文档介绍:答辩委员会主席型幺喳蔓博士学位论文邢蛞种艸泶锒愿伟〩细胞功能的影响内科学作者姓名:周南翔学科专业:学院怠⑺:湘雅二医院指导教师:霍继荣教授二。一。年五月分类号中南大学密级
作者签名:姓导师签名缸日期:盟年上月丛日学位论文版权使用授权书原创性声明本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名:本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。
中文摘要背景与目的:肝癌是我国常见恶性肿瘤之一,死亡率极高,在恶性肿瘤死亡排名中仅次于胃癌、食道癌而居第三位,在部份地区的农村中则占第二位。我国每年死于肝癌的人数约万人,占全世界肝癌死亡人数的%。目前引起肝癌发病的因素有多种,包括病毒性肝炎、黄曲霉素、遗传因素等,导致了癌基因的过度表达,抑癌基因丢失表达,最终引起肝癌的发生。是一个肝癌获得性的生长因子,近年来研究表明,在多种正常细胞和肿瘤存在高表达,能够促进细胞增殖、组织分化以及血管生成,与多种恶性肿瘤的侵袭、转移及其预后相关,其中包括了肝癌。本研究的目标是首先探讨该因子在肝癌与对照肝组织中表达情况,了解其表达与肝癌患者临床病理参数之间的关系,其中也包括了预后。然后再以肝癌细胞系魑DP停肦姆法探讨在肝癌发生过程的作用。方法:本研究收集了对配对的肝癌与其癌旁组织,然后利用常规的方法提取了它们的总4送猓猛姆法提取了赴淖躌。随后,将总肕逆转录酶逆转录成,使用实时荧光定量觳饬薍在肝癌组织、癌旁组织及赴蠬谋泶锴榭觥=步,利用免疫组化检测了在肝癌例涞牟钜毂泶锉泶铮⒎治隽烁没虮泶镉敫伟┗颊吡俅例敕前┳橹病理参数之间的关系。在下一步实验中,利用公司在博士学位论文
。实时荧光定量觳猓⑾值タ寺∠,测序确定序列是否完全正确。随后,利用将其转染到肝癌胞中,杀稻瘟菌素进行阳性克隆细胞筛选,天后,在培养板中出现了单克隆细胞。随后对这些细胞扩大培养,并提取这些细胞的总孀B汲蒫螅凳庇ü舛縋检测细胞中的干扰效率。确证干扰后蛋白表达水平。进一步,利用⑷砬碇湫纬珊吐闶笃は鲁闪鍪笛榧觳釮扇藕细胞增殖情况;最后,蚥∈以蛴糜诩觳釮扰后细胞迁移和侵袭情况的改变。结果:利用常规的方法,成功的提取了肝癌及其癌旁组织,以及赴淖躌。实时荧光定量觳夥⑾郑谒用的肝癌组织及赴校琀膍泶锪慷济飨愿哂癌旁临近非癌组织。免疫组化分析,明显在肝癌组织中高表达,且高表达的与肝癌的临床分期、掷嗪蚑分类呈明显相关。生存分析显示,随着表达升高,患者的预后也将明显缩短。多变量分析,是一个影响肝癌患者预后独立的预测因子。随后,..的慢病毒表达载体,序列分析表明完全正确。在将慢病毒表达载体转染到赴泻螅狙芯拷⒘宋榷ū泶株畇瓾瓜至俗罡叩腍表达抑制量,博士学位论文中文摘要
《靖扇疟泶镌靥澹苡抑制效率为%。表达分析显示,,畇瓾で线明显低于对照瓹和赴H砬碇湫纬墒笛橐同样出现了类似的情况。体内裸鼠成瘤实验分析,畇瓾赴闪龅奶寤椭亓恳裁飨缘陀诙哉障赴瓹值分别为和T谔逋庀赴ㄒ坪颓窒笛中,本研究也发现畇瓾ㄒ坪颓窒芰σ裁飨缘于对照狢和赴结论:高表达于肝癌组织和赴歉伟患者一个独立的预后预测因子。本研究成功构建了特异靶向效的抑制在细胞的表达。降低的表达导致了胞的增殖、迁移和侵袭能力明显减弱。或许是肝癌基因治疗一个良好的靶标。关键词:独立预后因子,肝癌获得性的生长因子,肝癌,短发夹琀细胞博士学位论文中文摘要
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