文档介绍：东北农业大学
硕士学位论文
根癌农杆菌介导的反义waxy基因对籼稻遗传转化的研究
姓名:刘南南
申请学位级别:硕士
专业:植物学
指导教师:朱延明

要摘籼稻植株再生体系的主要因素,建立了稳定,高效的籼稻植株再生体系;构建了适台于农杆菌介导法转化籼稻的植物表达载体:应用正交实验设计探讨了农杆菌介导法遗传转化的主要影响因素,建立了籼稻的遗传转化体系;将反义水稻蜡质基因和基因的融台基因导入籼稻,并进行了初步检测。狙芯恐饕=崧廴缦拢反义基因的植物表达载体的构建本实验构建了一个植物表达载体卡盒和一个植物表达载体,,选择标记基因为潮霉素磷酸转移酶基因,可作预实验使用;,各品种均在浓度为腘嘌嫌俗橹盏悸蚀锏阶罡撸直鹞T料阏ァ⒃练.%、粤泰基因型对愈伤组织诱导的影响五个品种在相同的浓度下愈伤组织诱导辜存在显著差异,最高的为粤泰.%,最低的为培矮接种方式对愈伤组织诱导的影响采用平放和斜插两种接种方式,平放方式好于斜插方式,愈伤组织诱导率最太嘌煞侄耘喟愈伤组织诱导的影响对愈伤组织诱导事较低的不育系品种培矮ü曰九嘌掷唷⒂谢物的添加、有机碳源的使用、植物生长调节剂及微量元素的调节的探讨,最终确定培矮俗橹盏寂嘌#篗疞./麦芽塘疞,愈采用二步分化法,对愈伤组织进行预分化处理和干燥处理,及通过调节培养基的渗透压使不定芽分化率大大提高,五个品种不定芽的分化率存在差异,均在低浓度光下诱导愈伤组织快速成苗低浓度光下诱导的愈伤组织直接转入分化培养基中可一次直接分化,分车研究以广东地区三个常规籼稻品种和两个不育系品种为材料,系统地探讨了影响基因上游调控序列调控,作为目的基因转化的材料。占.%、培矮差异可达%。伤组织诱导率可达.%。影响不定芽分化的因素%左右。.%。.%、\
初步尝试了农杆菌介导法转化籼稻花药和农杆菌介鄹去与种子浸泡法相结合转定除菌浓度为叽。。关键词籼稻;农杆菌介导;反义基因:植株再生:遗传转化化籼稻成熟胚,取得了一定进展,尚需进一步探讨。化率在%以上,大大缩短了培养周期。农杆菌介导的遗传转化体系的建立筛选压力的确定确定了五个品种的愈伤组织的潮霉素筛选浓度为/凰母銎分值某墒炫叩潮霉素筛选浓度为疞;四个品种的种子萌发的潮霉素筛选浓度为./除苗剂浓度的确定除菌剂选用先锋霉素,实验疞先锋霉素对农杆菌的抑制作用,晟后确不同基因型的蛩彩北泶锫蚀嬖诓钜欤直鹞T料阏ァ⒃练嵴影响遗传转化效率的主要因素的优化用正交实验设计探讨了农杆菌转化籼稻愈伤组织过程中的其它影响因素,确定的最优实验组合为:侵染菌液浓度为,共培养缓冲介质为培养基,,共培养时添加咸烟牵秩痉椒ú捎貌徽竦捶ǎ组织预培养时不添加,.%、培矮珿检测四个品种的转化愈伤组织经橹旧ǚ治觯觳獾絯蛏嫌分钟。愈伤组织中。东北农业大学理学硕士学位论文.%。.%、/,
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,全世界有二分之一的人以水稻作为主粮。在中国,水稻更是第一粮食作物,产量占全国粮食总产量的%左右。因此,水稻产量的增加,品质的改进和抗性的提高等对解决全球粮食问题具有举足轻重的影响。目前水稻的品种改良主要通过常规遗传育种和植物基因工程这两种途径进行,于植物基因工程可以定向的改变植物的某个性状,而成为更有效的分子育种途径。植物基因工程研究初期主要集中在抗病育种和抗虫育种方面。随着人民生活水平、健康水平的提高和国际农产品市场一体化所带来的农产品国际市场竞争的加剧,科学家们除了要考虑生产者的利益,还应更多的考虑消费者的利益,。稻米的品质主要由碾磨品质、外观品质、蒸煮食品质和营养品质所组成,其中,蒸煮食的品质和营养品质是最重要的,稻米的口感好坏是衡量稻米品质的主要指标,水稻种子胚乳中的淀粉分为直链淀粉和支链淀粉两种,直链淀粉占淀粉总量的多少直接影响到蒸煮食品质。籼稻中直链淀粉含量高,米饭干燥蓬松,色泽滞暗,饭质硬,食味不佳。本研究的目的就是建立籼稻高效稳定的再生体系和遗传转化体系。通过向直链淀粉含量高的籼稻中导入反义的水稻蜡质基因,来降低籼稻胚乳中的直链淀粉含量