文档介绍:蛋白质化学
1、试举例说明蛋白质结构与功能的关系(包括一级结构、高级结构与功能的关系)。
蛋白质的结构决定功能。一级结构决定高级结构的形成,高级结构则与蛋白质的功能直 接对应。
一级结构与高级结构及功能的关系:氨基酸在多肽链上的排列顺序及种类构成蛋白质的一 级结构,决定着高级结构的形成。很多蛋白质在合成后经过复杂加工而形成天然高级结构和 构象,就其本质来讲,高级结构的加工形成是以一级结构为依据和基础的。
有些蛋白质可以自发形成天然构象,如牛胰RNA酶,尿素变性后,空间构象发生变化, 活性丧失,逐渐透析掉尿素后可自发形成天然三级结构,恢复95%生物活性。这个例子说 明了两点:一级结构决定特定的高级结构;特定的空间构象产生特定的生物功能。
一级结构中,特定种类和位置的氨基酸出现,决定着蛋白质的特有功能。例如同源蛋白 中所含的不变氨基酸残基,一但变化后会导致功能的丧失;而可变氨基酸残基在不同物种的 变化则不影响蛋白质功能的实现。又如人类的镰刀型贫血,就是因为一个关键的氨基酸置换 突变后引发的。
某些一级结构的变化会导致功能的明显变化,如酶原激活过程,通过对酶原多肽链局部 切除而实现酶的天然催化功能。
高级结构与功能的关系:任何空间结构的变化都会直接影响蛋白质的生物功能。一个蛋白 质的各种生物功能都可以在其分子表面或内部找到相对应的空间位点。环境因素导致的蛋白 质变性,因天然构象的解体而活性丧失;结合变构剂导致的蛋白质变构效应,则是因空间构 象变化而改变其活性
2、参与维持蛋白质空间结构的力有哪些?
蛋白质的空间结构主要是靠氨基酸侧链之间的疏水键,氢键,范德华力和盐键维持的(盐 键又称离子健,是蛋白质分子中正、负电荷的侧链基团互相接近,通过静电吸引而形成的)
4、试述蛋白质多肽链的氨基酸排列顺序测定的一般步骤。
测定蛋白质分子中多肽链的数目。
通过测定末端氨基酸残基的摩尔数与蛋白质分子量之间的关系,即可确定多肽链的数目。
多肽链的拆分
几条多肽链借助非共价键连接在一起,称为寡聚蛋白质,如,血红蛋白为四聚体,烯醇 化酶为二聚体;可用8mol/L尿素或6mol/L盐酸服处理,即可分开多肽链(亚基).
二硫键的断裂
几条多肽链通过二硫键交联在一起。可在用8mol/L尿素或6mol/L盐酸豚存在下,用过 量的筑基乙醇处理,使二硫键还原为筑基,然后用烷基化试剂保护生成的筑基,以防止 它重新被氧化。
测定每条多肽链的氨基酸组成
水解,氨基酸分析仪
分析多肽链的N-末端和C-末端
多肽链端基氨基酸分为两类:N-端氨基酸和C-端氨基酸。
在肽链氨基酸顺序分析中,最重要的是N-端氨基酸分析法。
多肽链断裂成多个肽段,可采用两种或多种不同的断裂方法将多肽样品断裂成两套或 多套肽段或肽碎片,并将其分离开来。
分离肽段测定每个肽段的氨基酸顺序。
确定肽段在多肽链中的次序。
确定原多肽链中二硫键的位置。
酶
1、用图示说明米氏酶促反应速度与底物浓度的关系曲线,并扼要说明其含义。
匕户二响碱r (1)当[S]很低时,U与[S]成正比,表现一级反应。(2)随[S]
/>"洞《侦知 的增加,U也随[S]的增加而增加,但不成正比。(3)当[S]很大
| 时,u达到最大值Vm, [S]增加u不再增加,表现零级反应。
2、 什么是