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反相高效液相色谱法测定富硒脱水菜心中的硒代氨基酸年第卷第期艿期112实验部分硒是人类、动物和某些微生物必需的微量元素，(Glutathio-neperxidaseGSHPx)质氢过氧化物还原成无害的醇类或水，从而保护细胞和细胞膜免遭氧化损害的作用，因此，适量摄入硒，有助于增强机体免疫力’。硒在生物体内主要以有机硒化合物的形式存在，而硒代氨基酸则是人们日常[1](SeCys)(SeMe-Cys)(SeMet)富硒蔬菜是农产品领域的热点研究话题，相应的对其所含功能性成分硒代氨基酸的定性、定量检测也[3]方法主要有毛细管电泳法和色谱法，其中以高效液相色谱法最为常见，但针对不同样品不同研究者所采用的预处理方法、使用的衍生试剂、流[4~8](OPA)建立了富硒脱水菜心中硒代胱氨酸、硒***半胱氨酸和硒代蛋氨酸的测定方法，并对其精确度、回收率等进行了评价。仪器与试剂高效液相色谱系统，包括在线脱气装置、四元泵、自动进样器和觳馄晃辛骰旌掀鳎籓．／针头微孔滤膜过滤器。甲醇状、乙***状均购于美TEDIA三***乙酸均为分析纯，水为超纯水。硒代胱氨酸，，硒***半胱(selenomethylcysteineSeMeCys)(selenomethionineSeMet)(or-琽河赟公司。标准溶液及流动相的配置标准品储备液：以HCl100／以硒代氨基酸单体计⒂℃冰箱中储存。分别取以上标样液，用HCl001005mgL4100OPA10容1mL130IL2度为molL(pHlO2)匀，于冰箱中冷冻保存。A(pH=72)276mmoL***一四氢呋喃寤任：．。mmolL(122)色谱条件ODS(125m)0min8B17动相流速为富硒脱水菜心来源(8)品学院提供。菜心在菜薹形成期间以亚硒酸钠溶液进行喷施，以达到富硒的效果。采摘后的菜心采用如下工江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡，洗笱称费г海瘴尬L崛∪芗粒崛⌒Ч罴眩种硒代氨基酸的平均加标回收疞B(pH=72)809mm5min50B201％min0BmLmin摘要(SeCys)臀鞍彼的方法，优化了样品预处理方法，并评价其定量分析的线性、准确性、重复性和检出限，结果显示：以疞率为．ァ．在各硒代氨基酸的线性范围内，线性关系良好．；保留时间和峰面积重复性的相对标准偏差直鸬陀．ズ．ィ嵝蕴跫碌募斐鱿尬．．疞。关键词富硒脱水菜心，反相高效液相色谱，硒代氨基酸第一作者：硕士，工程师。20080427t20080912．．、．1111_
万方数据
—．HC1／线筭停疞曩／％⋯L3J结果与讨论艺制成成品：原料调理—切断一清洗一选别一烫漂一冷富硒脱水菜心中硒代氨基酸的提取水蛩岱提取：取样品g10超(01混匀，并在℃水浴下分别24816h7胄移取上清液，并在嫦麓⒋妗⒈赣肹。超声波法提取：取样品gi0不同(01溶解样品，混匀并在5024816h7g15迫∩锨逡海⒃贠℃下储存、备用将水提取液蛩崽崛∫用癿醋酸纤维薄膜过滤，滤液用—分析。以保留时间及相对保留时间的比较定性，峰高增量法确认，标准曲线3基酸进行分析，且各项参数不变，分析的各项性能参3338nm柱前衍生反相高效液相色谱法测定富硒脱水菜心中硒代氨基酸含量可靠性时，首先优化了硒代氨基酸的提取方法，并通过研究峰面积与其相应浓度的线性、—仪器的重复性、前处理过程的重复性、分析的回收率