文档介绍：第二军医大学
博士学位论文
胃癌及癌旁组织定量比较蛋白质组学研究
姓名:罗治文
申请学位级别:博士
专业:内科学(消化系病)
指导教师:朱樑
20070510
缩略词表第二军医大学博士学位论文挡缩略词袭
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\形≯锄晕导师签名:华签字日期:枷觐涠嗳签字日期:珈暾荚隆签字日期:年彳月多独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名:学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ
摘要白。锰超氧化物歧化酶、热休克蛋白∞、突变节蛋白等在胃癌中高表达;热休组织芯片;目的;本文采用荧光差异显示凝胶电泳蛋白质组学方法及质谱技术筛选并鉴定胃癌组织差异表达蛋白质,以期寻找胃癌特异的肿瘤标记物,用于临床胃癌筛查和诊断,并为寻找胃癌治疗药物靶点、了解胃癌发生发展的分子机制提供思路。方法:采用技术筛选癈荧光素标记的胃癌及对应癌旁组织差异表达蛋白质,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱虼V势准际踅屑ú⒎治觯钥赡苡屑壑档牟异表达蛋白质采用组织芯片免疫组化技术、反转录聚合酶链式反应技术分别从蛋白质水平及信使核糖核酸水平进行验证。结果:共筛选出个差异表达蛋白质点,其中龅鞍字实阍谖赴┳橹猩系鳎蛋白质点下调,对个蛋白质点采用质谱技术成功鉴定。根据蛋白质功能的不同,这些差异表达的蛋白质可以分为啵悍肿影槁隆⑾赴羌艿鞍住⒋酶类、细胞周期相关蛋白、细胞增殖、分化和凋亡相关蛋白和脂质代谢相关蛋克蛋白、前列腺素厦浮⑽岷系鞍、锌指蛋白⑽⒐艿鞍譨真核生物翻译延伸因子琣等在胃癌组织中低表达。结论:技术是筛选胃癌组织差异表达蛋白质有效方法。锰超氧化物歧化酶、突变结蛋白、瓤赏晌N赴┱断的特异标记物。对若干差异蛋白的编码基因的转录水平进行的分析发现,基因转录和翻译水平存在弱相关性。关键词:胃癌;肿瘤标记物;蛋白质;蛋白质组;蛋白质组学;定量蛋白质组学、前列腺合酶.、
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胃癌及癌旁组织定量比较蛋白质组学研究摘要技术成功鉴定。霾钜斓鞍椎、、∞蠵图,目的:胃癌是常见的消化道恶性肿瘤,死亡率仅次于肺癌,而胃癌高死亡率的主要原因是没有有效的早期筛选和诊断方法,本文采用荧光差异显示凝胶电泳蛋白质组学方法及质谱技术筛选并鉴定胃癌组织差异表达蛋白质,以期寻找胃癌特异的肿瘤标记物,用于临床胃癌筛查和诊断,并为寻找胃癌治疗药物靶点、了解胃癌发生发展的分子机制提供思路。方法:采用技术筛选、癈荧光素标记的胃癌及对应癌旁组织差异表达蛋白质,并用基质辅助激光解吸电离飞行时问质谱虼V势准际进行鉴定并分析,对可能有价值的差异表达蛋白质采用组织芯片免疫组化技术、反转录聚合酶链式反应技术分别从蛋白质水平及信使核糖核酸水平进行验证。结果:共筛选出个差异表达蛋白质点,其中蛋白质点在胃癌组织中上调,个蛋白质点下调,对个蛋白质点采用质谱但数据库无与之匹配的蛋白质,可能为新蛋白。根据蛋白质功能的不同,这些成功鉴定的差异表达的蛋白质可以分为啵悍肿影槁隆⑾赴羌艿鞍住⒋酶类、细胞周期相关蛋白、细胞增殖、分化和凋亡相关蛋白和脂质代谢相关蛋白。在我们的实验中发现,胃癌组织中表达都有改变,上调而下调,提示这两种热休克蛋白作为分子伴侣在胃癌发展过程中起到一定作用。免疫组化及验证实验发现在胃癌组织中均上调,其中在粘液细胞中明显上调而在主细胞、壁细胞几乎无表达,因此,可能与粘液细胞癌、印戒细胞癌的发生过程有关。本实验还发现,微管蛋白、翻译延伸因子认赴骨架蛋白在胃癌组织中下调,而突变结蛋白上调。可能与蛋白合成、细胞骨架和、第二军医大学博士学位论文挡中文摘要
形成或凋亡有关。前列腺厦浮⒐、备二磷酸醛缩酶碳酸酐酶、锰超氧化物歧化酶⑾吡L宥塘聪8饷、胆红索还原酶⑶谆匪谹础⒐趸锩等许多代谢酶在胃癌组织中表达差异。在胃癌组织中也发现了一些与细胞周期、脂质代谢及细胞增殖、分化、凋亡有关的蛋白差异表达,如硒结合蛋白⑿指蛋白⒃刂鞍譇⑾宋鞍自璙等。但免疫组化结果提示谖赴┳橹⑽秆鬃橹罢W橹泄惴罕泶铮虼耍赡苁窍赴还中表达的常见蛋白,与胃癌的关系并不密切。与正常组织比较,淙在