文档介绍：. .
优选
蛋白酶产生菌的筛选
组别：第*组
班级：生工**班
组员：***
指导教师：***
一、实验目的
学****从自然界中别离蛋白酶产生菌
二、实验容
蛋白酶产生菌的别离
三、实验原理
许多细菌和霉菌产生蛋白酶，细菌中的芽孢杆菌是最常见的蛋白酶产生菌。本实验将土壤样品悬液加热处理，杀死非芽孢细菌及其他微生物后进展划线别离得到芽孢杆菌，将其接种到奶粉培养平板并进展培养，根据奶粉平板的水解圈做初筛。将初筛的蛋白酶产生菌接入产酶培养基振荡培养，测定蛋白酶的活力，最终得到产蛋白酶的芽孢杆菌。也可直接将细菌接种到奶粉培养平板进展培养，别离筛选其他蛋白酶产生菌。
四、实验材料和用具
：土壤样品
：牛肉膏蛋白胨培养及平板、奶粉培养基平板、45mL无菌水〔带玻璃珠〕、芽孢染色液、
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优选
：紫外分光光度计、显微镜、恒温水浴锅、摇床、酒精灯、接种针、游标卡尺、无菌移液管、无菌试管、量筒、容量瓶、漏斗、试剂瓶、漏斗、载玻片、滤纸、擦镜纸。
五、操作步骤
〔一〕配制所需培养基
按照以下配方配制所需的培养基
牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏，蛋白胨 1g，NaCl ，琼脂～，水 100ml，pH
配制200mL
奶粉培养基：牛肉膏，蛋白胨 1g，NaCl ，
琼脂，水 100ml，pH ～
脱脂奶粉 3g，配制200mL
〔二〕别离
，用无菌水植被1:10土壤悬液。
:10土壤悬液5 mL，注入已灭过菌的试管中，将此试管放入75～80℃水浴中热处理10min以杀死非芽孢细菌。
～200μL，涂布接种到牛肉膏蛋白胨培养平板，后将平板倒置，于30～32℃下培养24～48h.
，选择外表枯燥、粗糙、不透明的菌落，挑取少许菌苔涂片，做芽孢染色，判断是否为芽孢杆菌。
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优选
〔三〕筛选
1、从判定为芽孢杆菌的菌落处，分别挑取少许菌苔，先接种奶粉斜面培养基，再转接奶粉培养基平板上，30～32℃下培养24～48h。
2、选择水解圈直径与菌落直径比值大的菌，接入牛肉膏蛋白胨培养基30-32℃振荡培养48小时，将发酵液过滤或离心，取清夜检测蛋白酶活力进展复筛。
六、实验结果：
相关图片：
〔2〕菌株的别离
根据菌落大小、形状、外表光泽、