文档介绍：细胞原代培养细胞生物学实验报告计划
细胞原代培养细胞生物学实验报告计划
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细胞原代培养细胞生物学实验报告计划
物学实验报告计划
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细胞原代培养细胞生物学实验报告计划
四分之一米粒大小）。
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7、向碎块中加入一滴管胎牛血清将组织碎块切散，用滴管将组织碎块接入培养瓶中，静置
一分钟，再加入 5ml 完全培养液，将瓶子翻转倒置后在 37 度培养箱中放置 2-3 小时，待组
织块微干与瓶壁贴牢后再将瓶子翻转过来，于培养箱中培养。
8、将用过的试剂仪器等摆回原处，将超净台打扫干净，封闭照明灯及抽风机。
9、实验后数小时后去察看组织块中细胞迁移情况，并拍摄照片。
五、实验结果
原代培养留宿后次日中午一点拍照，察看细胞迁移情况，以下是我们小组的实验结果。
鸡胚成纤维细胞原代培养（倒置显微镜 20×）
鸡胚成纤维细胞原代培养（倒置显微镜 20×）
显微镜下可察看到鸡胚组织块邻近有大量细胞迁移。迁移出来的细胞呈纤维状，贴壁
生长。实验结果比较理想，细胞迁移较多，大多数细胞活性较好，呈梭形附着与瓶壁上，且
没有污染发生。
操作时应注意的问题：原代培养要注意无菌操作，实验过程中要保持组织块浸润在缓冲
液中，接种组织块到培养瓶中后应待组织略干燥，能黏附于瓶壁时再使之与培养液接触，翻
转培养瓶时要轻，勿使组织块漂浮起来。如果组织块没有粘壁，则细胞不易生长，既使生长
也因没有贴在瓶壁上，而无法收集到。
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六、思考题
1、从细胞增殖及调控角度来看哪一种组织和器官合用于原代培养实验
取材应注意组织种类、分化程度、年纪等，一般来讲，胚胎组织较成熟个体组织容易培养，分化低的较分化高的组织容易生长，肿瘤组织较正常组织容易培养。
2、怎样提高原代细胞培养的成功率
取材要注意新鲜和保鲜，取材应严格无菌。取材和原代细胞制作时，要用尖利的器械，
如手术刀或剃须刀片切碎组织，尽可能减少对细胞的机械损害。要认真去除所取材料上的血液（血块）、脂肪、坏死组织及结缔组织，切碎组织时应防止组织干燥，可在含少量培养
液的器皿中进行。取材应注意组织种类、分化程度、年纪等，一般来讲，胚胎组织较成熟个体组织容易培养，分化低的较分化高的组织容易生长，肿瘤组织较正常组织容易培养。
操作过程要时刻注意无菌操作，不能污染，仪器尽量靠无菌操作台内放。在办理胚胎的
时候要干净利落。在剪碎细胞的时候，尽量剪得碎一点。翻转培养瓶应待组织块略干燥，能粘附于瓶壁时再使之与培养液接触。翻转时要轻，勿使组织块漂浮起来。