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细胞原代培养细胞生物学实验报告计划.docx

上传人:泰山小桥流水 2022/6/14 文件大小:18 KB

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文档介绍:细胞原代培养细胞生物学实验报告计划
细胞原代培养细胞生物学实验报告计划
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细胞原代培养细胞生物学实验报告计划
细胞划
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细胞原代培养细胞生物学实验报告计划
7、向碎块中加入一滴管胎牛血清将组织碎块切散,用滴管将组织碎块接入培养瓶中,静置
一分钟,再加入5ml完全培养液,将瓶子翻转倒置后在37度培养箱中放置2-3小时,待组
织块微干与瓶壁贴牢后再将瓶子翻转过来,于培养箱中培养。
8、将用过的试剂仪器等摆回原处,将超净台打扫洁净,关闭照明灯及抽风机。
9、实验后数小时后去察看组织块中细胞迁移情况,并拍摄照片。
五、实验结果
原代培养过夜后第二天中午一点拍照,察看细胞迁移情况,以下是我们小组的实验结果。
鸡胚成纤维细胞原代培养(倒置显微镜20×)
鸡胚成纤维细胞原代培养(倒置显微镜20×)
显微镜下可察看到鸡胚组织块周边有大量细胞迁移。迁移出来的细胞呈纤维状,贴壁
生长。实验结果比较理想,细胞迁移较多,大部分细胞活性较好,呈梭形附着与瓶壁上,且
没有污染发生。
操作时应注意的问题:原代培养要注意无菌操作,实验过程中要保持组织块浸润在缓冲
液中,接种组织块到培养瓶中后应待组织略干燥,能黏附于瓶壁时再使之与培养液接触,翻
转培养瓶时要轻,勿使组织块漂浮起来。如果组织块没有粘壁,则细胞不易生长,既使生长
也因没有贴在瓶壁上,而无法收集到。
细胞原代培养细胞生物学实验报告计划
细胞原代培养细胞生物学实验报告计划
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六、思考题
1、从细胞增殖及调控角度来看哪一种组织和器官适用于原代培养实验
取材应注意组织种类、分化程度、年龄等,一般来讲,胚胎组织较成熟个体组织容易培养,分化低的较分化高的组织容易生长,肿瘤组织较正常组织容易培养。
2、怎样提高原代细胞培养的成功率
取材要注意新鲜和保鲜,取材应严格无菌。取材和原代细胞制作时,要用尖利的器械,
如手术刀或剃须刀片切碎组织,尽可能减少对细胞的机械损害。要仔细去除所取材料上的血液(血块)、脂肪、坏死组织及结缔组织,切碎组织时应防备组织干燥,可在含少量培养
液的器皿中进行。取材应注意组织种类、分化程度、年龄等,一般来讲,胚胎组织较成熟个体组织容易培养,分化低的较分化高的组织容易生长,肿瘤组织较正常组织容易培养。
操作过程要时刻注意无菌操作,不能污染,仪器尽量靠无菌操作台内放。在办理胚胎的
时候要洁净利落。在剪碎细胞的时候,尽量剪得碎一点。翻转培养瓶应待组织块略干燥,能粘附于瓶壁时再使之与培养液接触。翻转时要轻,勿使组织块漂浮起来。
3、鸡胚成纤维细胞的应用
鸡胚成纤维细胞拥有相对容易获得、增殖能力强、适应性强、优异的耐受性,性状比较
稳定等特点,使得其广泛的被应用于分子和细胞生物学研究

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