文档介绍：实验一硫酸铜标准曲线的制作
一、目的与要求
1、掌握分光光度比色法的基本原理和应用；
2、熟悉标准曲线的意义及掌握制作方法；
3、了解光谱光度法技术的具体内容及应用；
4、了解回归分析法。
吸收光分析和散射光分析三大，
与其
的器列表如下（表 1）：
表 1
光光度分析与其的器
光分析型
器名称
1、各种
射光
2、火焰光度法
3、原子光光
4、光比色
1、各种光比色
吸收光
2、各种可光区及紫外光区分光光度
3、各种外光区分光光度
4、原子吸收分光光度
1、各种度
散射光
2、各种乳光
3、各种生物光度
生物体内有多物成分含量甚微，
不能用重量分析法或溶量分析法去定，
而常用比
色法来定，法灵敏、迅速、准确，是当前常用的一种定量分析法。
一、比色法原理
比色法是根据溶液色深浅的比来定物含量的一种方法，
在原理上用了有色溶
液光吸收的物理定律—— Lambert-Beer
定律。
Lambert 定律：
一束色光通一有色溶液后，
由于溶液吸收了一部分光能，
透光的度就会减弱。
若溶液的度不，溶液的厚度越大（即在溶液中所的途径越）
。透光的减弱也越
著。
若 I 0=光通溶液前的度（入射光度）
=光通溶液后的度（透光度）
b= 溶液的厚度
Ⅰ
Ⅰ。
b
⋯⋯①
图
常数 K1的数随光的波和溶液的性而改。
Lambert 定律适用于一切溶液（ 2）。
Beer 氏定律：
一束色光通一有色溶液后，
透光度就会减弱。
若溶液的厚度不，溶液
的度越大，透光度减弱就越著。
若 C=溶液的度
⋯⋯⋯⋯⋯②
Beer 氏定律并非适用于一切溶液，有的溶液若度改，溶的解离或聚合的程度也
3
随着改。
若两种溶液是由同一种物配成， k1= k 2，合并①及②式：得下式：
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ ③
③式中可用 T 表示， T 称透光度。
A 或 OD称吸光度 ( 或称光密度或称光密度
) ，有－ LogT=A（ OD）
A=KCb⋯⋯⋯⋯④
依照④式，以相同方法配制含有同一种物的两种不同度的溶液，准液度
C ，厚度 b
1
，未知液度 C ，厚度 b