早产儿脑白质损伤动物模型的建立及早期干预的疗效研究.pdf

文档介绍：广州医学院硕士学位论文早产儿脑白质损伤动物模型的建立及早期干预的疗效研究姓名:荣箫申请学位级别:硕士专业:儿科学指导教师:周伟20100601广州医学院硕士学位论文早产儿脑白质损伤动物模型的建立及早期干预的疗效研究2 早产儿脑白质损伤动物模型的建立及早期干预的疗效研究学科专业:儿科学学位申请人:荣箫指导教师:周伟教授中文摘要目的:建立4日龄SD大鼠脑白质损伤(white matter damage,WMD)动物模型,早期分别给予重组人红细胞生成素(binant human erythropoietin,rHuEPO)、单唾液酸四己糖神经节苷脂(monosialotetrahexosylganglioside, GM1)或神经生长因子(nerve growth factor,NGF)治疗,比较干预后大鼠的病理形态学和神经行为功能改变情况,探讨rHuEPO、GM1和NGF对缺血缺氧性WMD新生大鼠的神经保护作用,为临床早期干预早产儿脑白质损伤提供依据。方法:4日龄SD大鼠290只,随机分为5组:假手术组、生理盐水(saline, NS)组、EPO组、GM1组和NGF组。假手术组仅切开颈部皮肤,分离双侧颈总动脉,再缝合颈部伤口,其余四组结扎双侧颈总动脉,再分别予以等体积的NS ml/g、EPO 5 IU/g、GM1 mg/g、NGF 2 IU/g腹腔内注射,GM1和NGF间隔24h重复给药,共给药5次。各组动物分别于术后(假手术组于对应时间)24h、48h、72h、7d、26d称量体重,再断头处死。常规H-E染色观察脑白质损害情况,免疫组织化学染色观察各时间点髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、β淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,β-APP)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)抗原的表达。术后26d(生后30d)采用悬吊、斜坡和旷场试验进行神经行为学检测。广州医学院硕士学位论文早产儿脑白质损伤动物模型的建立及早期干预的疗效研究3 结果:,各时间点NS组、EPO组、GM1组和NGF组大鼠的体重均与假手术组有显著性差异(P<);而术后7d、26d EPO组大鼠和术后26d NGF组体重高于NS组,差异有显著性意义(P<);各时间点GM1组大鼠体重均与NS组无显著性差异(P>)。,光镜下表现为脑室周围白质细胞肿胀、坏死和凋亡、组织疏松、侧脑室进行性扩大。与NS组比较,EPO组、GM1组和NGF组大鼠光镜下病理变化无明显差异,但术后72h片状坏死的范围较小,术后7d、26d侧脑室扩大的程度较轻。,APP、GFAP阳性细胞百分率增高。给予rHuEPO、GM1、NGF治疗后,术后72h、7d MBP阳性细胞百分率较NS组增高,术后72h、7d、26d APP阳性细胞百分率较NS组降低,术后48h、72h、7d、26d GFAP阳性细胞百分率较NS组降低,差异有显著性意义(P<)。, NS组、EPO组、GM1组和NGF组大鼠反应迟钝、自主活动减少,灵活性、稳定性降低。NS组大鼠悬吊、斜坡和旷场试验的结果均差于假手术组,差异有显著性意义(P<);EPO组、GM1组和NGF组大鼠悬吊、斜坡和旷场试验的结果均优于NS组,差异有显著性意义(P<)。结论:采用4日龄SD大鼠双侧颈总动脉结扎术可成功建立早产儿脑白质损伤动物模型;早期给予EPO、GM1或NGF干预治疗能够促进大鼠的体格生长和脑白质损伤的修复,改善其神经行为功能。关键词:脑白质损伤,重组人红细胞生成素,神经节苷脂,神经生长因子,早期治疗广州医学院硕士学位论文早产儿脑白质损伤动物模型的建立及早期干预的疗效研究4 Establishment of an Animal Model of White Matter Damage and Research of the Effect of Early Treatment Major: Pediatrics . Candidate: Rong Xiao Supervisor: Professor Zhou Wei Abstract Objective: To establish a 4-day-old SD rat animal model of white matter damage, and observe the changes of pathological morphology and neurob