文档介绍：第五章色谱分析法
Chromatography
第一节概述 Introduction
色谱法是一种重要的分别分析方法，它是依据组分在两相中作用实力不同而达到分别目的的。
一、历史
Tswett 探讨植物色素分别，样中的各组分具有不同的K值是分别的基础；
某组分的K = 0时，即不被固定相保留，最先流出
安排比也称：
容量因子(capacity factor)；容量比(capacity factor)；
1. 安排系数与安排比都是与组分及固定相的热力学性质有关的常数，随分别柱温度、柱压的变更而变更。
，数值越大，该组分的保留时间越长。
3. 安排比可以由试验测得。
K与k的关系：
（7）容量因子k与保留值的关系
证明：当组分一半流精彩谱柱时
色谱基本保留方程
四、分别效能指标
1、选择性（相对保留值）
相对保留值由两组分的热力学性质确定，与色谱柱的长短粗细无关。
2、区域宽度
色谱峰的区域宽度是色谱流出曲线的重要参数之一，用于衡量柱效率及反映色谱操作条件的动力学因素。表示色谱峰区域宽度通常有三种方法。
1. 标准偏差
。
2. 半峰宽W1/2
即峰高一半处对应的峰宽。它与标准偏差的关系为
W1/2=
3. 峰底宽度W
即色谱峰两侧拐点上的切线在基线上截距间的距离。
它与标准偏差的关系是 W = 4 
从色谱流出曲线中，可得很多重要信息：
(i) 依据色谱峰的个数，可以推断样品中所含组分的最少个数；
(ii) 依据色谱峰的保留值，可以进行定性分析；
(iii) 依据色谱峰的面积或峰高，可以进行定量分析；
(iv) 色谱峰的保留值及其区域宽度，是评价色谱柱分别效能的依据；
(v) 色谱峰两峰间的距离，是评价固定相（或流淌相）选择是否合适的依据。
色谱分析的目的是将样品中各组分彼此分别，组分要达到完全分别，两峰间的距离必需足够远，两峰间的距离是由组分在两相间的安排系数确定的，即与色谱过程的热力学性质有关。
但是两峰间虽有确定距离，假如每个峰都很宽，以致彼此重叠，还是不能分开。这些峰的宽或窄是由组分在色谱柱中传质和扩散行为确定的，即与色谱过程的动力学性质有关。因此，要从热力学和动力学两方面来探讨色谱行为。
3、分别度
分别度考虑了保留时间和峰宽度，是一个综合指标：
R < 两峰明显重叠
R = %分别
R  两峰完全分开
小结
色谱法探讨的核心：
选择最适合的色谱体系和条件、在最短的时间达到最佳的分别效果。
其次节色谱理论
一、塔板理论
目的——从理论上得到描述色谱流出曲线的方程，并通过这一方程各参数来探讨影响分别的因素。
假设（1）色谱柱存在多级塔板;
（2）组分通过时在每级塔板两相间达到一次平衡;
r —— 塔板数
N—— 转移次数
设：有A、B两组分，kA = 2
kB = 1/2
当 N = 0 r = 0
A组分在两相分配达平衡后：
流动相分量=
固定相分量=
r0
r1
r2
。
。
。
。
。
。
。
。
rn
下表列出经过各级转移后组分在每一级塔板中的量：
r0
r1
r2
。
。
。
。
。
。
。
。
rn
当经过1次转移（N=1）以后：
第0级塔板：r = 0
组分的分量 =
第1级塔板：r = 1
组分的分量 =
组分在两级塔板上的量可表示为：
若抽象成一个规律：
由上表可以看出，经N次转移后，组分在各级塔板上的量符合二相式分布，即
当N = 4时，组分分布在5级塔板上：
以A组分为例，5级塔板上的重量分别是：
任一级塔板上的分量为的展开式对应的一项，可用一个通式表示：
当求最终一级塔板的组分的量时，r = n，以
作图，即得色谱流出曲线，因此上式称为流出曲线方程。
t
C
tR
Cmax
对于两个组分A和B，假如k不同，则流出曲线的形态不同：
由于所获得的流出曲线在N很大时呈正态分布，因此可将流出曲线方程转化为正态分布方程形式：
将此方程与标准正态分布曲线方程比较：
可知：
所以：
或：
根据：
所以：
n 称为色谱柱的理论塔板数。
因为tR是热力学常数，当色谱柱的长度确定，理论板数目n越大，色谱峰