文档介绍：【实验题目】
微生物生理生化实验
【实验目的】
认识生理生化的意义。
掌握几种常用生理生化的实验方法。
【实验器械】
1、菌种：
枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，铜绿假单胞菌，变形杆菌，产气肠杆菌
入适合卢戈氏碘液于
平板中，轻轻旋转平板，使碘液平均铺满整个平板，察看培育皿中菌落四周可否
有无色透明圈产生，如有无色透明圈出现，说明淀粉已经被水解，该种菌为阳性，反之则为阴性。记录实验结果。
2、油脂水解试验
（1）倒平板：依据油脂培育基配方配制固体油脂培育基，灭菌，待培育基冷却至50℃左右，
充分振荡，使油脂平均散布，在酒精灯火焰旁倒平板，每组两个平板。
（2）标志：用记号笔在在平板底部划成四部分，并标好需要接种的菌的编号。
（3）接种：在无菌操作台大将枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、变形杆菌和铜绿假单胞菌分别划十
字线接种于平板相对应部分的中心，如图2所示。
（4）培育：将平板倒置，在28℃温箱中培育两天。
（5）察看：拿出平板，察看菌苔颜色，若是出现红斑点，说明脂肪水解，为阳性反响。记录
实验结果。
葡萄糖发酵实验
（1）培育基的配制：依据糖发酵培育基配置葡萄糖发酵培育基，分装至试管中，先将德汉氏
小管中注满培育基，再把德汉氏小管倒置放入试管中，注意不要让德汉氏小管中进入空
气，每组3只试管，灭菌。
（2）接种：待培育基冷却至常温时，在无菌操作台上，取葡萄糖发酵培育基试管2支分别接
入大肠杆菌和一般变形杆菌，接种后轻摇试管，使其平均，防备倒置的小管进入气
泡，第3支不接种，作为比较组。在各试管外壁上贴上标签，标签上分别注明发酵
培育基的名称和所接种的细菌菌名。
（3）培育：把接种后的试管在试管架上放好，将其放入培育箱中于28℃下培育两天。
（4）察看：察看各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡，并记录实验结果。
乳糖发酵实验
（1）培育基的配制：依据糖发酵培育基配置乳糖发酵培育基，分装至试管中，用胶头滴管往
德汉氏小管中注满培育基，再把德汉氏小管倒置放入试管中，注意不要让德汉氏小管中
进入空气，每组五只试管，灭菌。
（2）接种：待培育基冷却至常温时，在无菌操作台上，取乳糖发酵培育基试管2支分别接入
大肠杆菌和一般变形杆菌，接种后轻摇试管，使其平均，防备倒置的小管进入气泡。在
试管外壁上贴上标签，标签上分别注明发酵培育基的名称和所接种的细菌菌名。
（3）培育：把接种后的试管在试管架上放好，将其放入培育箱中于28℃下培育两天。
（4）察看：察看各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡，并记录实验结果。
吲哚实验
（1）培育基的配制：依据蛋白胨水培育基配方配制培育基，分装至试管中，每组3只，高压
灭菌锅灭菌
（2）接种：待培育基冷却后，在无菌操作台大将大肠杆菌、产气肠杆菌分别接入2支蛋白胨
水培育基，节余一只试管不接种，作为空白比较，贴好标签。
（3）培育：把接种后的试管放在试管架上放好，将其放入培育箱中于28℃下培育两天。（4）察看：往培育后的蛋白胨水培育基内加入3-4滴***，摇动数次，静