文档介绍：枸杞多糖检测方法研究
保健食品的区分
第一代保健食品：以民间的处方，秘方为基础，根据原材料的功能推断保健品的功能，未经严格的科学检测的保健食品
第二代保健食品：经过动物实验和人体实验证明产品具有某项生理调节功能，其安全性，功能性都较挥发性，衍生化操作烦杂、费时
GC
分离速度快，分离效果好，重现性好，不破坏样品，前处理简单
HPLC
操作方便，灵活但是灵敏度不高，对含量微小的物质不易检出，且无法确定单糖摩尔比
TLC
组成成分
单糖：
阿拉伯糖，鼠李糖，木糖，甘露糖，半乳糖，葡萄糖
半乳糖醛酸---硫酸-半胱氨酸反应定性
蛋白质---斐林-酚法
枸杞多糖中单糖的组成及其摩尔比
名称
单糖组成
摩尔比
LBP-6
Ara：Rha：Xyl：Man：Gal：Glc
:：：019:1:1
LBP-Ⅰ
Ara：Rha：Xyl：Man：Gal：Glc
1:::::
LBP-Ⅱ
Ara：Rha：Xyl：Man：Gal：Glc
1:::::
LBP-Ⅲ
Ara：Rha：Xyl：Man：Gal：Glc
:::::1
LBP-Ⅳ
Ara：Rha：Xyl：Man：Gal：Glc
::::1:
蛋白多糖G
Ara：Rha：Xyl：Man：Gal：Glc
:::::
LBP-V
Ara：Gal：Glc
::10
LBNP
Ara：Xyl：Man：Gal：Glc
：：::
LBPC2
Xyl：Rha：Man
：：1
LBPC4
Glc
红外光谱法
方法：KBr压片法 波长范围：4000~650cm-1
目的：主要是确定吡喃糖的苷键构型及常规观察其他官能团。
枸杞多糖常见官能团红外光谱解析
紫外检测
在200nm处有多糖
的特征吸收峰
在260nm处没有吸收峰，
说明不含核酸
在280nm处吸收峰不明显，
说明蛋白质含量低
发展趋势
1) 枸杞多糖结构与活性、功能的关系方面得到明确，市场上将有更多以枸杞多糖为主要成分的新药，并且都是采用现代生物技术，从分子、细胞、器官等分子生物水平上研究活性因子的结构、含量及其作用机理，准确评价其功效。
2）因为有统一的质量标准，明确的结构证明其新颖性，创新性，实用性，中国除了主要围绕枸杞多糖的提取方法、纯化工艺、分离技术、制备治疗脂肪肝胃溃疡药物应用等专利以外，还将得到更多关于枸杞多糖的组分结构、作用机制、药理功效等方面的专利。
拟采取的研究方法及可行性分析
(1)通过HPLC法测定枸杞多糖的分子量
可行性分析：严邦干曾采用此法测定香菇多糖的分子量，该方法较其他多糖测定法具有迅速，简便，准确的特点，是目前较为行之有效的测定方法.
(2)通过柱前衍生化高效液相色谱法测定枸杞多糖的单糖组成及其摩尔比
可行性分析：采用 3-***-1-苯基-2-吡唑啉***(PMP)在碱性条件下与单糖定量缩合生成单糖PMP 衍生物,用常规的紫外检测器和 C18烷基键合柱 ,建立适于多糖单糖组成测定的 HPLC新方法 ,达到灵敏、快速、准确、方便和可在线大批量分析的目标。
HPLC法测分子量
色谱柱：protein kw-804
检测器：示差折光检测器
温度：室温
流动相：醋酸钠缓冲溶液
以不同分子质量的标准右旋糖酐分子的分离保留时间与相应的分子质量建立分子质量对数值绘制标准坐标曲线，待测得枸杞多糖经分离后得到不同分子质量峰的保留时间值，通过标准曲线即可计算枸杞多糖的分子质量分布（由分子质量计算辅助软件自行运行）
HPLC检测单糖组分和含量
直接进样检测：
柱子：carbohydrate 柱
氨基键合相柱（Spherisorb NH2 ，Hypersil NH2）
检测器：示差检测器
缺点：柱子成本高，氨基键合柱易与还原糖生成希夫碱，缩短柱子的寿命
示差检测器灵敏度低，不适用于梯度洗脱
柱前衍生化HPLC测枸杞多糖中的单糖组成
前处理：
：
***醋酸适用于植物细胞壁多糖，糖蛋白，糖***聚糖的水解
（1）多糖的水解常用硫酸，其用量不易控制，过多会导致多糖样品的炭化，而产生杂质峰，过少又会水解不完全。本法采用三***醋酸可较好的实现多糖的水解。
（2）实验中要尽量减少样品的水分含量，以免影响衍生化的结果，