文档介绍：实验八分光光度法测定铁
内容:P232-234
一、实验目的
1. 掌握邻菲咯啉分光光度法测定微量铁的原理和方法
2. 掌握光吸收曲线的绘制及最适宜波长的确定
3. 掌握分光光度计的基本原理和使用方法
二、实验原理
邻菲咯啉法是测定微量铁最常用和最灵敏的方法。此法准确度高,重现性好,配合物十分稳定。Fe2+离子与邻菲咯啉反应生成极稳定的桔红色配合物,反应式如下:
该配合物的最大吸收波长为510 nm,摩尔吸收系数κ= ×104 L·mol-1·cm-1。
由于Fe3+也会与邻菲咯啉反应,生成3:1的淡蓝色配合物,故必须先将Fe3+还原为Fe2+,再与邻菲咯啉反应。一般用盐酸羟***作为还原剂,显色前将Fe3+全部还原为Fe2+。
Fe2+与邻菲咯啉在pH = 2 ~ 9范围内都能显色,但为了尽量减少其它离子的影响,通常在微酸性(pH ≈ 5)溶液中显色。
本法选择性很高,相当于含Fe量40倍的Sn2+,Al3+,Ca2+,Mg2+,Zn2+,SiO32-;20倍的Cr3+,Mn2+,V(V),PO43-;5倍的Co2+,Cu2+等均不干扰测定。
三、实验仪器与试剂
1. 仪器
UV-9100紫外可见分光光度计容量瓶(50 mL) 烧杯(250 mL)
玻璃比色皿(1 cm) 吸量管(1 mL,2 mL,5 mL,10 mL)
洗耳球洗瓶
2. 试剂
铁标准溶液(100 mg·L-1)[1] 铁标准溶液(10 mg·L-1)[2]
NaAc(1 mol·L-1) 盐酸羟***(10 %)(新配制)
邻菲咯啉( %)(新配制) 待测试液
四、实验内容
1. 溶液的配置
取7只50 mL容量瓶,编号,、、、、、 mL 10 mg·L-1铁标准溶液, mL待测试液, mL 10 %盐酸羟***溶液, mL % mL 1 mol·L-1 NaAc溶液,用水定容至刻度,摇匀,显色。
2. 吸收曲线的绘制
以1号溶液为试剂空白作参比,用1 cm比色皿,在分光光度计上,在440 ~ 560 nm间,每隔10 nm测定一次吸光度。然后以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制吸收曲线,从吸收曲线上确定邻菲咯啉法测定铁的适宜波长(一般选用最大吸收波长λmax)。
3. 标准曲线的绘制和Fe含量的测定
在最大吸收波长(510 nm)处,用1 cm比色皿,以试剂空白为参比,测定各溶液的吸光度。以铁标准溶液浓度ρ(Fe2+)为横坐标,相应的吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线。根据被测试液的吸光度,从标准曲线上查出被测试液的浓度,再换算出原试液含Fe2+量(单位为mg·L-1)。
五、注意事项
1. 容量瓶和移液管的使用:洗涤、润洗、移液等;P31-32
2. 溶液配制:定容、(流水作业)一人添加一种试剂;移液管专管专用。
2. UV–9100型紫外可见分光光度计(包括比色皿)操作规范及注意事项。P104-108
比色皿的使用:用手接触毛玻璃面,使用时,先用待装液润洗2~3遍,装液为2/3左右,用搽镜纸将外表残留的液滴檫干。
UV-9100分