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培养基的成分包括哪几类?各有何作用?
在培养基成分中什么决定着外植体发育方向?
抗生素的作用是什么?
配制MS培养基时,琼脂和蔗糖的加入量一般为多少?
?
第一节外植体的选择
第二节外植体的灭菌方法
第三节污染原因和预防措施
第三章外植体的选择和灭菌
第一节外植体的选择
1外植体部位
2取材季节
3器官的生理状态和发育年龄
4选取适宜的大小
1外植体部位
植物体的各个部位,如茎尖、茎段、皮层及维管组织、髓细胞、表皮、块茎的贮藏薄壁细胞、花瓣、根、叶、子叶、鳞茎、胚珠和花药等。
不同种类的植物以及同一植物的不同器官对诱导条件反应不一致的。
大多数植物来说,茎尖是较好的部位,其形态已基本建成,生长速度快,遗传性稳定,是获得无病毒苗的重要途径。
外植体选择的原则
培养材料的来源是否保证是否会引起不良变异。
叶片的来源最有保证,许多植物的组织培养以叶片为外植体。
对一些培养较困难的植物,可以通过子叶或下胚轴来建立其组织培养再生体系。
2取材季节
在生长开始的季节取材,若在生长末期或已进入休眠时取样,则外植体可能对诱导反应迟钝或无反应。
3器官的生理状态和发育年龄
植物上部器官的生长时间虽短,其生理年龄却较老,更接近发育上的成熟,越容易形成花器官。而越向基部,则生理年龄越小。
下部组织越易形成营养器官,上部组织易形成花器官。
通常年幼组织比年老组织有较高的形态发生能力,容易培养,有较大的再生能力。
4选取适宜的大小
材料太大易污染;材料太小,难于成活。
。
如果是胚胎培养或脱毒培养的材料,则应更小
第三章外植体的选择和灭菌
第一节外植体的选择
第二节外植体的灭菌方法
第三节污染原因和预防措施
1外植体的灭菌方法
预处理:先对植物组织修整,去掉不需要的部分,流水中冲洗干净。
预处理的植物材料的灭菌:
原则:
充分灭菌,但不伤外植体
不同的外植体,灭菌的要求也不一样