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博纳艾杰尔科技
9;dz_******@ 客服:400-606-8099
2010年11月12月广东
影响C18色谱柱性能的主要因素
色谱柱与色谱填料的特性
1、柱填料
硅胶纯度
粒径
比表面积
孔径
2、色谱柱的构型
色谱柱直径
色谱柱长度
3、固定相
键合类型
残余硅羟基的影响
反相键合相的保留行为
键合硅胶的稳定性
物理因素
化学因素
柱填料对色谱柱性能的影响
柱填料对C18色谱柱性能的影响:硅胶纯度II
硅胶纯度-金属含量
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柱填料对C18色谱柱性能的影响:粒径
硅胶粒径和类型对柱效的影响
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硅胶粒径和类型对压力的影响
柱填料对C18色谱柱性能的影响:粒径II
目前市场主要可供选择的填料粒径
,,-快速液相色谱柱:匹配快速色谱仪
-多孔壳层:在常规液相色谱仪上实现快速分离(Halo)
,-普通快速分析
-常规分析
颗粒越小,柱效越高,
但是耐污染性能下降,柱压升高.
柱填料对C18色谱柱性能的影响:孔径I
多孔材料的95%以上表面在孔内部
样品分子直径小于平均孔径,才能进入微粒内部
孔径至少是样品流体学直径的4倍
300Ǻ孔径用于:超过50个氨基酸的肽或25个残基的低聚寡核苷酸
样品分子直径小于平均孔径,才能进入微粒内部
柱填料对C18色谱柱性能的影响:孔径II
小生物分子的保留值在小孔径填料通常更大
条件: C8色谱柱,×150mm, ,
A溶剂,%TFA水溶液;
B溶剂,%TFA于80%乙***- 水中;
20min梯度,10 30%B;60°C,
色谱柱的构型对色谱柱性能的影响
固定相对色谱柱性能的影响