文档介绍：城乡与环境
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实时荧光定量技术在出入境检验
检疫巾的应用研究进展
薛银刚陈军宋白薇石建华鞠慧萍郑晨
苏州出入境检验检疫局汀苏苏州
中图分类号: 文献标识码: 文章编号:—一
荧光定量技术在植物病害早期诊断中的应用细菌性条斑病菌廖晓兰等,; 张华等,等。此外, 国内
荧光定量反应体系最初以插入式染料溴化乙锭作为发光物质, 已报道的可利用荧光定量技术准确成功鉴定的还有梨火疫病菌钱国趣
逐渐发展出更灵敏的染料以及荧光探针,根据发光原理主要分为两大等,;许景升等,、西瓜细菌性果斑病菌伍永明等,
类:染料法和探针法。荧光定量技术以其特异好、灵敏度高、快速和蕃茄溃疡病菌吴兴海等,等。
简便和可定量定性等特点, 目前已开始应用于植物病害的检验检疫中。传统检测方法主要是采用生物学法、血清学法或传统,这些疗法
植原体导致的植物病害上的应用费时又费力。而荧光定量可以做到实时监控,并且检测速度和灵敏殷
荧光定量用于检验检疫已经有段时间,但最近几年才被用于植物病都要高于傲方法。此外,荧光定量没有后处理过程,简化的实验步
原菌质体即植物原体的检测。如洋葱黄化病.,、菊骤, 提高了检测效率徐小刚等,
花黄化病植原体.,和苹果丛生植原体的检测植物病原真菌导致的植物病害上的应用
.,,此外等人利用植物病原真菌是指能够造成植物病害、利用柯赫法则可以加以签定的一
探针以及根据植原体核糖体设计的引物对葡萄藤黄化病进行检验, 类病原物。这类真菌会对植物造成不同程度的损害,囡此准确快速地检测
使检测过程相对于传统而言缩短了检测时间,增加了方法的特异性和灵这些病原物是出入境检验检疫中重要的作之一段维军等, 。
敏性。因此利用荧光定量可以对植原体进行分类鉴定,从而提高出入近几年来,国内外已有大量利用荧光定鼙技术鉴定植物病原真菌的
境检验检疫的效率。报道,如关于小麦印度腥黑穗病菌易建等,、苇状兰茅内生
病毒导致的植物病害上的应用真菌和多年生黑麦草内生真蔚黄国
烟草环斑病毒是中国公布的二类禁止进境检疫有害生物,它可侵明等,等的报道。易建平等人利探针,并根据、爱
染科多种植物, 自然寄主有豆类、花卉、果树和烟草等重要经济印度腥黑穗病菌和黑麦草腥黑穗病菌的核糖体¨ 序列设计了两对通用物
作物, 其传播途径多,危害性大。因此对于的检验检疫显得尤为重建立了对应病菌的实时荧光检测方法。此方法可直接用于检测样品的冬
要黄江华等, 。杨伟东等首次应用免疫捕捉反转录实孢子,整个过程只需天。黄国明等人为了检测苇状羊茅内生真菌和黑友
时荧光技术检测, 由综合运用了抗原体特异性结合、核酸分子草内生真菌,根据基因设计了通过探针及引物,根据基
杂亲、岛灵敏度实时荧光技术的优点,提高『检测的特异性、灵敏度因设计两种真菌的特异探针及共用引笏,通过通用探针的单色荧
和稳定性等,解决了检测工作中由于隐症、病毒浓度低、干扰物质光和特异探针的双色荧光,建立了这两种真菌的蔚丝及单粒种子的
存在而影响检测结果的问题。与此同时,郑耘等通过研究首次荧光检测方法,提高了灵敏度,缩短检测时间至个小时
应用自接结合反转录实时荧光技术检测,为植物病毒病原检测提供线虫导致的植物病害上的应用
了一套科学的方法。马铃薯孢囊线虫是世界农、上主要的线虫