文档介绍：实时荧光定量PCR在临床医学中的应用
罗氏应用科学部在临床医学的整体解决方案
基因诊断
病原体测定
肿瘤诊断
基因差异表达研究
主要内容
PCR与基因诊断技术
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基因诊断即通过核酸的分子生物学检测直接检测基因的存在状态或缺陷对疾病做出诊断的方法。
Polymerase chain reaction(PCR),聚合酶链式反应,是一种DNA的快速扩增技术。
1998年,荧光定量PCR技术开始在中国应用于临床检测。
荧光定量PCR技术
实时荧光定量PCR技术,是指在反应体系中加入荧光标记,利用荧光信号积累实时检测整个PCR过程,通过标准曲线对PCR终产物的分析,最终实现对未知的起始模版进行定量分析的一种技术,是迄今对已知基因序列的核酸测定中最灵敏的方法。
荧光染料:SYBR Green I、EVA Green,ResoLight
荧光探针:TaqMan、Hybridization Probes、Molecular Beacon
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罗氏应用科学部整合细胞组学和基因组学的研究流程
LightCycler® Real-Time PCR Platform 超过十年的实时荧光 PCR 的技术革新
LightCycler® Instrument
32
3
20
Sample number
Detection channels
Sample volume [µl]
LightCycler® Instrument
32
6
20 / 100
LightCycler® 1536 Instrument
1536
2
– 2 µl
1998
2003
2009
2005 / 2008
LightCycler® 480 Instruments (I, II)
96 / 384
5 / 6
10 - 100 / 5 - 20
Breakthrough to higher Throughput
LightCycler® 480 广泛的应用
绝对定量
相对定量
基于熔解曲线的基因分型
终点法基因分型
AT
AA
TT
基于HRM的突变扫描
罗氏应用科学部在临床诊断的整体解决方案
基因诊断
病原体测定
定性分析
绝对定量
耐药性研究
肿瘤诊断
基因差异表达研究
主要内容
荧光定量PCR技术的临床应用
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病毒性肝炎(HBV、HBV-YMDD、HCV)的基因检测
性病相关病原体(CT、NG、UU、HPV)的基因检测
优生优育项目诊断:人巨细胞病毒(HCMV)、单纯疱疹病毒II型(HSV)、风疹病毒
其它病原体检测:结核杆菌、肺炎支原体、EB病毒、伤寒杆菌、幽门螺旋杆菌等