文档介绍：锐普PPT培训课件
——让专业变得一目了然
原理
仪器
固定相和流动相
系统适用性试验
分离条件优化
注意事项
应用
液-液分配色谱法和化学键合色谱法
液-固色谱法
离子交换色谱法
离子对色谱法
离子色谱法
空间排阻色谱法
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仪器:输液系统、进样系统、色谱柱系统、检测系统和数据记录处理系统
-微处理机界面装置
原理
仪器
固定相和流动相
系统适用性试验
分离条件优化
注意事项
应用
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仪器:(1)高压输液泵
恒压泵:变化较大,流量不稳
恒流泵:多采用
原理
仪器
固定相和流动相
系统适用性试验
分离条件优化
注意事项
应用
往复注射泵
串联式双柱塞往复泵
Agilent1100泵
Perkin Elmer公司
Hewleet Packard公司
Agilent公司
设计了可变冲程和多元梯度泵,可完成自动稀释,自动衍生化等
有二元高压梯度泵和低压四元梯度泵,在低流速下也能达到最高精密度
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仪器
(2)分离和进样系统
原理
仪器
固定相和流动相
系统适用性试验
分离条件优化
注意事项
应用
基本要求:密封性好,死体积小,重复性好,保证中心进样,进样时队色谱系统的压力、流量影响小
进样系统:分为进样阀和自动进样装置,一般高效液相用六通进样阀
分离系统:色谱柱,由柱管和固定相组成,按主要用途分为分析型和制备型。其中最常用的是十八烷基键合硅胶,即ODS柱,可用于反相色谱或离子对色谱
为符合GLP,美国惠普公司开发了色谱柱识别器,更加保证了色谱柱的可靠性及测定方法的准确性。
柱性能指标包括在一定实验条件(试样、流动相、流速、温度)下的柱压、理论塔板高度H和理论塔板数n、对称因子f、容量因子k和选择性因子α的重复性或分离度R。
仪器:(3)检测系统:
种类:分专属型和通用型两种UVD、RID、ECD、IRD、NMRD、
MSD、ELSD、LALLSPD等。
要求:灵敏度高、噪音低、线性范围宽、重复性好和适用范围广。
专属型:举例:紫外检测器
适合范围:具有π-π*和n-π结构的化合物
(美国惠普(HP)公司推出了二极管阵列检测器(又称硅靶摄像管),
它由311-1024个二极管组成。,实时
采集全光谱。)
通用型:举例:蒸发光散射检测器
适合范围:挥发性低于流动相的组分,主要用于检测糖类、高级
脂肪酸、磷脂、维生素、氨基酸、甘油三酯及甾体等
缺点:灵敏度比较低,尤其是有紫外吸收的组分(其灵敏
度比UV检测约低一个数量级),不能很好的解决痕
量物质的检测难题
原理
仪器
固定相和流动相
系统适用性试验
分离条件优化
注意事项
应用
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固定相和流动相:
化学键合相
(1)固定相
原理
仪器
固定相和流动相
系统适用性试验
分离条件优化
注意事项
应用
化
学
键
合
固
定
相
分类
应用举例
非极性
十八烷基(C18)、辛烷基(C8)、***(C1)与苯基等
弱极性
醚基和二羟基键合相
极性
常用氨基、***基键合相,是分别将氨丙硅烷基(≡Si(CH2)3NH2)及***乙硅烷基(≡Si(CH2)3CN)键合在硅胶上制成
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固定相和流动相
(1)固定相
性质:
R1 -HCl R1
≡Si-OH+Cl-Si-C18H37 ≡Si-O –Si-C18H37
R1 R1
特点:
使用过程中不流失;
化学稳定性好;
热稳定性好;
选择性好;
有利于梯度洗脱;
原理
仪器
固定相和流动相
系统适用性试验
分离条件优化
注意事项
应用
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固定相和流动相
(2)流动相
纯溶剂的极性参数Pˊ定义为:
Pˊ=lg(Kg〞)e+ lg(Kg〞)d+ lg(Kg〞)n
Pˊ值越大,则溶剂的极性越强。实际工作中流动相的选择是关键。
原理
仪器
固定相和流动相
系统适用性试验
分离条件优化
注意事项
应用
不与固定相发生化学反应
对试样有适宜的溶解度
必须与检测器相适应
纯度要高,粘度要小
基本要求
使用前过滤、脱气
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固定相和流动相
(3)分离条件的选择
3-10
3
原理
仪器
固定相和流