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大鼠胚脑皮层源性神经干细胞体外培养及增殖分化特点.pdf

文档介绍

文档介绍:安徽医科大学
硕士学位论文
大鼠胚脑皮层源性神经干细胞体外培养及增殖分化特点
姓名:任于果
申请学位级别:硕士
专业:神经病学
指导教师:高宗良;陈先文
20050601
英文缩略词表碱性成纤维生长因子腱状神经营养因子二氨基联苯氨有丝分裂源表皮生长因子胶质细胞源性神经营养白血病抑制因子受体姒脑源性神经营养因子讳逡脱氧尿苷牛血清蛋白胚胎干细胞胎牛血清胶质纤维酸性蛋白胰岛素样生长因子多巴胺微管相关蛋白因子安擞医科大学硕士学位论文猟籅’—猯猘—
神经元限制性前体细胞神经干细胞全反式维甲酸酪氨酸羟化酶神经生长因子壬敏医科大学硕士学位论文—籺
缮“移≥学位论文作者签名%,。少.≯导师签名.,,钐“日期:肺学位论文独创性声明学位论文使用授权声明,。掌,◆夕师期滴各.:夕二者妒怍沦期学日本人所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确说明并表示谢意。留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版,有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅,有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索,有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。、使用学位论文的规定。学校有权保齁、又:
大鼠胚胎大脑皮层源性神经干细胞体外培养及增殖分化特点建立大鼠胚脑皮层神经于细胞体外培养模型及鉴定技术:探讨其在表皮生长因子饔孟碌脑鲋撤只匦裕Sτ蒙窬上赴浦仓瘟粕窬膊方法:%奈扪G免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞特异性标记:单细胞连续克隆实验及免疫标记证实神经干细胞自我增殖能力:诱导细胞分化。及免疫标记了解细胞向胞化学标希ń峁ヒ陨侠镅粜员泶铮な荡讼赴窬上赴粜裕倍比稀释法单细胞连续克隆实验,观察一周内细胞生长,有形状规则的神经细胞球形成;掺入实验,%的细胞核呈免疫染色阳性,提示此来源离胎鼠皮层细胞,发现生长速度明显减慢,细胞小时贴壁分化及死亡率明;在细胞悬液中加入%嘌⑾窒赴诩涌欤只俣纫嘌杆伲结论:⒕哂性鲋场中文摘要目的:提供基础。高糖/嘌逋馀嘌秆∩窬上赴神经元及神经胶质细胞的分化能力。结果:—.靤笫笈吣云げ惴掷氲纳窬上赴逋庑∨嘌—煊写罅肯赴蛐纬桑褐票赋傻ハ赴禾谂嘌小时内具有增殖能力:细胞悬液贴壁培养一周,和免疫细胞化学染色检测,证实其可分化为神经元和神经胶质细胞。コ鼸后体外培养分显增加;细胞球形成慢且形状不规则:所培养细胞在第四次传代时几乎完全死亡。扪G逄跫律窬上赴盏挤只笤ケ泶颩一一周后%以上分化细胞表达,表达的细胞不足%。免疫细%表达安徽医科大学硕士学位论文
自我更新能力和多向分化潜能特性;了其向神经元方向分化的比率;虼俳∨嘌纳窬上赴诓⑾蚪质细胞方向分化。神经干细胞俳窬上赴逋庠鲋常⑻岣关键词细胞分化表皮牟长因子大脑皮质安擞医科太学硕士学住论文
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簄.%一猣%痚安币娇拼笱妒垦宦畚;’琽,,,.甌,瑂;瓼/
大鼠胚胎大脑皮层源性神经干细胞体外培养及增殖分化特点把的发展——一种崭新的治疗方案一细胞治疗长期以来,中枢神经系统遗传变性性疾病的治疗一直是人类面临的巨大挑手术时机、部位等方面存在着难以克服的问题。过去年生物医学取得了迅猛视。中枢神经系统的细胞治疗指的是将自体的、同种异体的或异种的活细胞经目前获得神经干细胞的常用方法为:赴嘌<创幽阅谔囟ǖ胞在体外纯化较困难,且在分离过程中亦易造成细胞损伤,影响细胞的活化并促入神经干细胞使其细胞周期不断循环往复,以阻止细胞分化进程,促进自我复制,战,传统药物和手术干预在一定时期取得有限的进展,目前在药物作用的效果、过加工处理谋浠虿桓谋渌堑纳镅匦后。移植于患者脑内特定区域,以达到治疗目的。此种细胞应具有以下特点:子谔逋馀嘌⒃鲋常⒔立细胞株:梢员豢寺』蚨ㄏ蛴盏挤只L囟ㄉ窬赴易于进行基因修饰;【移植后长期存活,且对受体无害并与其整合而发挥功能;神经干细胞由于自身特性而受到青睐。部位分离出神经干细胞并在体外合适的条件下培养。原代培养的神经干细胞可以直接用于神经细胞移植,优点是可以与其他神经细胞整合,完成生理学上的细胞替换,理论上可以作为把目的基因带到病变脑区的最佳载体细胞。但是神经干细进细胞的凋亡,降低了移植的质量。ⅰ坝郎鄙窬上赴怠<床捎基因转移的方法,将外源性蛋白基因、拇骉抗原基因等从而建立神经干细胞系。这种“永生化”的神经于细胞虽然具有生长条件低、体外培养容易、增殖快

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