抗癌药物敏感实验.ppt

文档介绍：抗癌药物敏感实验

一般按试验最高浓度的100倍配制储备液。
体外药物敏感性试验所用药物浓度,,1,10倍的剂量进行。亦可参考以下公式:
试验药物浓度(ug/ml)=
试验时,一般3-5个对数级浓度
×
平均体重 60
mg×平均体表面积 100

根据实验目的选用体外培养的肿瘤细胞系如国际通用的Hela细胞系等,也可用肿瘤患者的新鲜手术标本制成细胞悬液备用。

:合成化合物或植物提取物纯品的半数抑制浓度IC50<10ug/ml或植物粗提物的IC50<20ug/ml,并且有细胞毒性的剂量依赖关系,其最高抑制效应达80%以上;发酵液IC50大于1:100,则判定样品在体外对细胞有杀伤作用。
:
实体瘤疗效以瘤重抑制百分率表示,即
瘤重抑制率=(1-试验组瘤重/对照组瘤重) ×100%
中草药抑制率>30%,合成药>40%
腹水型肿瘤疗效可以生命延长率表示,即
生命延长率=(试验组存活天数/对照组存活天数-1) ×100%
非腹腔给药生命延长率>50%,腹腔给药生命延长率>75%


美蓝法:利用活细胞的脱氢酶提供氢离子,是美蓝还原为甲烯白(无色)。细胞死亡后脱氢酶失活无法使美蓝还原,故染成蓝色。检验用药后死细胞数反映药物抑瘤作用。假阳性率较高。
:
根据活细胞在低浓度染液不着色特点,%%伊红试验。药物导致细胞死亡时,细胞膜通透性增加,染料易透过细胞膜。加药后计算阳性细胞数以示药效。由于濒临死亡的细胞不易着色,故假阴性较高。

1)药物对细胞的杀伤率
将对照组及加药组生长曲线的线性部分延伸至Y轴,可分别得到截距NO及NO’。代表接种后具有增殖力的细胞数。
药物对增殖细胞的杀伤率= [( NO- NO’)/ NO]×100%
2)药物对倍增时间(TD)的影响
TD = t ㏒2
㏒Nt- ㏒N0
t代表培养时间, N0 和Nt分别代表接种后及培养1小时后的细胞数。
如倍增时间延长则表明药物使细胞增殖能力减弱。