文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
eNOS基因转染内皮细胞种植***人工血管的实验研究
姓名:薛冠华
申请学位级别:博士
专业:外科学(血管外科)
指导教师:张柏根

基因转染内皮细胞种植***人工血管的实验研究捎酶咝У淖H痉椒ā!V侍宸ǎ鄄熳H緀虻腅逋饪基因。结果:原代培养的呈多角形,铺路石样镶嵌排列;免疫组化法鉴定有大量表达;透射电镜有—棒管状小体;原代库~致。结论:成功培养出两种细胞及鉴定基因序列的正确性,为以后实验采用脂质体法转染基因于稳定的实验犬;和免疫组化法检测,蜃H居谑笛槿逋馀嘌哪谄は赴血小板聚集和抗平滑肌细胞,增殖效用:以及种植于诰度斯ぱ9芎螅踩肴啥觯鄄炱湓镀谕ǔ┞是榭觥R云谖第一部分实验犬内皮细胞和平滑肌细胞的培养及基因的鉴定目的:建立稳定的实验犬和逑导凹╡颉7椒ǎ悍直鸩捎酶消化法和组织块贴壁法原代培养实验犬和徊捎妹盖泻筒庑蚍ḿ培养的氏赋に笮危写罅縬—泶铮凰鈋蛐蛄杏牖打下坚实基础,保证了整个课题实验的科学性。内皮型一氧化氮合酶基因转染实验犬内皮细胞目的:探讨基因转染实验犬及转染后细胞的生长增殖情况。方法:转染效果;分别采用比色法和酶联免疫法检测细胞培养液蛌的浓度。结果:—~氧化氮合酶提高***人工血管远期通畅率进行有意义的探索。第二部分上海第二医辩大学级博士学位论文,
基因在Ⅲ。结论:体外压灌注两步法”种植笮】诰度斯ぱ9埽⑿猩璧缇岛屯干涞缇导觳橹渗入法,检测转染基因的抗血小板聚集和抗鲋承в谩=峁貉P“.降为组..籹增殖在不同时间组与正常组一层完整连续内膜,细胞结构完整、胞质均匀。结论,种植效果满意;.;转染后生长增殖和ǘ任薏钜臁=论:通过脂质体法成功地将基因转染于稳定的实验犬;转染后后本身的生物学特性没有改变。基因成功转染于实验犬,从而可以更有效地发挥分泌的一氧化氮琋作用。第三部分转染基因的内皮细胞抗血小板聚集和抗平滑肌细胞增殖目的:检测转染基因的功能。方法:分别采用比色法、,可明显抑制实验犬血小板聚集和鲋常灰种效果在培养至币逊浅C飨裕辽倏沙中抑制效果可被阻遏。体外转染基因的具有抗血小板聚集和抗鲋承в茫=步应用于体内提供了实验依据。第四部分转染基因的内皮细胞种植于***人工血管目的:探讨转染基因的种植***人工血管的情况。方法:采用“高植效果。结果:种植人工血管,贴附率在%以上;笥铱裳由煳植后生长’隋况良好。转染基因的成功种植于***人工血管,使在体内发挥生物学功能真正成为可能。上海第二医科大学级津士学证论文
目的:检测转染基因的种植***人工血管的在体实验效果。方法:部/阻塞,未转染组近半数阻塞;术后ゴ咳斯ぱ9茏楹臀醋H组/救ú孔枞皇鹾,未转染组全部阻塞,组仍基本通第五部分转染基因的内皮细胞种植***人工血管的在体实验将转染基因种植的***人工血管植入实验犬股动脉,分、、行、扫描电镜和透射电镜观察植入后效果。结果:术后,单纯人工血管组有一半以上/的血管阻塞;术后,单纯人工血管组全畅/5缇导觳楸砻鳎琫槿斯ぱ9芮幻鍱帕薪裘埽纬梢徊连续完整的内膜,仅见少许红细胞、血小板及白细胞沉积。结论:种植转染基因的人工血管植入实验犬股动脉,ǔ┬Ч己谩N=徊接τ于临床提供了实验依据。关键词:内皮细胞平滑肌细胞远期通畅率殖人工血管集基基因转染增聚血小板因上海嚣二医科大学∞毁谤士学位论文
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前言自体血管无疑是理想的血管移植物,但由于人体非必需血管长度和直径为代表的高分子合成材料做成的人工血管问世以来,经过不断改进,植八大血管的远期效果良好。但用于重建***动脉和静脉时,尤其是膝这些问题,自九十年代以来,人们开始致力于改进抗血小板功能的研究,以期提高其与血液的相容性。这些措施包括植入前腔内预衬及具有抑制多种血液成分如血小板、中性粒细胞、单核细胞粘附于,并可抑有限,使其来源受到限制。几十年来,经过不断改进,人工血管的应用取得特别是以膨体聚四***乙烯关节以下的血管重建,五年以上远期通畅率仅占%。这主要是人工血管植入动脉环境后其特殊的位置及血液动力学状态,以及移植物内表面与血液的