文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
兔眼虹膜色素上皮细胞体外培养实验研究
姓名:赵平千
申请学位级别:硕士
专业:眼科学
指导教师:罗敏
20040401
英文缩略词表视网膜色素上皮细胞年龄相关性黄斑变性虹膜色素上皮细胞细胞角蛋自二氨基联苯胺杜氏改良依格培养液乙二胺四乙酸标记抗生链菌素生物素磷酸盐缓冲液胎牛血清透射电镜免疫细胞化学技术扫描电镜猺疭疭.
——~一神经外胚层,且获得自体赴先菀祝浦埠罂关键词:兔眼虹膜色素上皮细胞细胞培养年龄相关性黄斑变性是严重损害视功能的眼病之一,传统的药物、激光光凝等治疗方法效果不理想。异体赴浦仓瘟艫浦埠蠓⑸宿主免疫排斥反应;自体赴浦玻质醪僮骼眩滓鹗踔谐鲅<分离培养、赴隦细胞功能的对比研究、动物及人赴蕴逡植研究已成为近年来的研究热点。本试验采用细胞培养技术,探讨兔眼虹膜色素上皮细胞体外培养和鉴定方法,并对体外培养的赴镅匦越辛搜芯浚=窈蟾徊窖究赴δ芗白蕴逡浦蔡峁┝顺渥愕南赴丛春椭匾5氖笛榛建立兔眼虹膜色素上皮细胞逋馀嘌⒗┰鎏逑担还鄄霫细胞的超微结构,探讨其鉴定方法;研究体外培养的赴镅匦裕联合两次酶消化加机械分离的方法分离兔眼赴ㄅ卫度旧ǚú定细胞活力。采用含不同浓度胎牛血清的培养基在体外对赴行原代及传代培养扩增,倒置相差显微镜对细胞生长的动态变化进行观察、摘要体外术后增殖性玻璃体视网膜病变妊现夭⒎⒅ⅰ细胞与赴避免宿主免疫排斥反应,有望替代赴浦灿谑油は虑弧细胞的今后进一步研究赴δ芗白蕴逡浦泊蛳禄材料和方法摄像。目的
超微结构;通过细胞倍增时间、总分裂次数、细胞生长曲线等指标的测定研应用免疫细胞化学技术闫紫赴堑鞍譇/蛋白单克隆抗体运嘌南赴屑ǎ徊捎蒙璧缇怠⑼干涞缇倒鄄霫细胞的究体外培养兔眼虹膜色素上皮细胞的生物学特性。鶬细胞~冢后开始生长,细胞大多呈多角形或细胞冢~焐と诤衔O赴ゲ悖赴翁朐嗨疲庖呦赴Ъ际跞旧广谱细胞角蛋白疉、鞍椎タ缇倒鄄煜允荆篒细胞表面有丰富的粗细长短不一的微绒毛,细胞浆内含有色素颗粒和丰富的细胞器。赴と诤铣傻南赴ゲ憔哂ィ幌赴对鍪奔湮~欤蛔芊至汛问~次。敢换捣掷胍幻赶ㄒ子诓僮鞒晒β矢撸竦玫耐醚跧细胞纯度隆抗体岷偷缇迪鹿鄄煜赴某⒔峁箍捎美醇↖细胞。孟赴嘌际酰酝醚跧细胞进行原代和传代培养、体外大量扩增及对其生物学特性进行研究,为以后赴墓δ苎芯亢妥蕴逡浦提供了充足的细胞来源和重要的实验基础。方形,少数为梭形,~天融合为上皮细胞样单层细胞。第一次传代的着细胞传代数的增多细胞拉长体积增大。赴谔逋馀嘌纱~。福捣掷耄赶ǚ掷肱嘌某晒β饰%;ù.%±ィù,是体外分离和培养兔眼赴睦硐敕椒āτ妹庖呦赴Ъ际广谱细胞角蛋白疉、蛋白单克结果结论兔眼虹膜色素上皮细胞体外培养实验研究
英文摘要墨鸭崾憔ス缏敷未陨呷橛ぶ琣!!猲.’;;籆.,,琧琣瑃—猠琱—;琣猺琲疭瑃疭琫.
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正文言引一一神经外胚层,而且获得『錓细胞容易,移植后可避免宿主免疫排斥年龄相关性黄斑变性等视网膜色素上皮赴δ芤常所致视网膜病变是常见的致盲眼病,在西方国家为首要致盲眼病。随着我国向老龄化社会发展,这一类疾病在我国将会越来越多,成为我国主要致盲但琒等人的研究表明,异体词故峭忠焯迮咛赴移植于视网膜下腔后发生了宿主免疫排斥反应,出现黄斑囊样水肿,视力下降。为避免宿主免疫排斥反应,有研究者采用自体周边视网膜的赴人们注意到赴洳坏隦细胞有解剖连续性和共同的胚胎来源反应。一些初步的实验研究也提示赴赡芫哂杏隦细胞相似的吞噬、降解、屏障和视黄醇代谢等功能。因此有人设想采用白体赴浦灿谑油は虑弧S纱薎的分离培养、赴隦细胞功能的对研究、动物及人赴蕴逡浦惭芯垦杆倏U蛊鹄础早在几十年前,人们已经能够成功地分离和培养赴云湫翁眼病之一。治疗上尚缺乏有效措施。浦彩跗鹱远兰桶耸甏年状谓逋培养的人类赴晒σ浦灿诤锏牟Aど希级甑姆⒄梗前浦泊蛹际醴矫娼惨亚饔谕晟疲訟扔胧油ど厣掀に鸷相关眼病的治疗有一定疗效。以往认为外层视网膜无血管分布,赴间及紧密连接复合体可屏蔽大分子物质通过,视网膜下腔是“免疫赦免区”。进行移植,但是获得自体赴氖质醪僮骼眩滓鹗踔谐鲅!⑹网膜脱离及术后增殖性玻璃体视网膜病变妊现夭⒎⒅ⅰU庑┪题的出现限制了蕴逡浦驳墓惴毫俅灿τ谩近些年来,研究者开始寻找一种可用来替代南赴>喾奖冉希
和功能等