文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
血清阴性脊柱关节病易感基因的找寻及发病机理初步研究
姓名:龚卫娟
申请学位级别:博士
专业:免疫学
指导教师:范丽安

血清阴性脊柱关节病易感基因的找寻及发病机理初步研究中文摘要墓因第和舛棺佣嗵栽谌鋈禾逯分布及与血清阴性青柱关节靖关联研究第一部分博士研究生:龚卫娟血清阴性脊柱关节病琒且郧恐毙约疾病,包括反应性关节炎、牛皮癣关节炎、虹膜炎性关节炎、肠炎性关节炎。这些疾病虽病理特征及临床表现各有特点,但都不同程度地与瓸相关,其中以最为显著。近年来关于的家系和双生子研究资料提示:脊柱关节病属多基因遗传,广义的遗传度达%,但乖旧碇苯硬斡階⒉〉奈O度仅为%,在蚰诨蚯蛲饣勾嬖谄渌恍┗虿斡階⒉基因与狟紧密连锁,具有高度的多态性,多表达在上皮细胞和成纤维细胞的表面,可与细胞表面受体结合调节免疫反应,提示其可能是某些喙丶膊〉暮蜓』颉A硪环矫妫然发现階墓亓R延甑氖奔洌獳姆⒉』,目前仍不清楚。近年来发现瓸分子可识姆⒉」亓#黄浯慰寺”泶锪个不同的瓸分子,观察它们对外周血细胞功能的调节,研究肿拥拿庖叩鹘诠δ苁欠癫斡隨的发病;最后初步探讨了这鯤—肿佣訬赴蜃臃置诩氨砻媸芴灞泶锏挠跋臁为了分析上海汉族、云南傣族和新疆维吾尔族三个群体基因外显子的多态性,并探讨基因外显子和亩嗵杂胙G逡跣约怪关节病姆⑸欠翊嬖诠亓#捎镁酆厦噶捶从Γ蛄刑匾斓墓押塑账崽疭方法,分析虾:鹤濉颇洗鲎濉陆岫逭外显予和亩嗵浴=峁允驹诤鹤濉⒋鲎搴臀岫逯蟹直鸺觳獬个等位基因,其中在汉族和维吾尔族中频率最高,而傣师:范丽安上海第二医科大学上海市免疫学研究所柱炎V鞯囊焕嗉怪Ⅶ诀墓亟诤退闹ü亟谑芩鸬别细胞表面的杀伤免疫球蛋白样受体通过此受体可以调节细胞及表达此受体的一部分赴墓δ堋NA松钊肓解姆⒉』恚究翁馐紫纫訫蚄为候选基因,探讨它们是否与常人群,上海地区汉族鼴患者和例正常个体导针杂交丘洛第二压甜天学博士饱盘摘暮,猺..
第三部分三个肿佣匝G逡跣郧嘀亟诟庵苎狽细胞毒活性影响的研究第二部分跋煅G逡跣约怪亟诓∩巡〉难芯族中的频率最高。雒褡錗任换蚱德史植几鞑幌嗤维吾尔族的等位基因分布与另外两个民族相比,具有非常显著性差异。±等位基因分布具有民族地区特异性:而等位基因与姆⑸赡无直接的关联,的频率在±橹械南灾呖赡苡捎诤瓸基因存在连锁不平衡导致。为了探讨蚴欠癫斡胙G逡跣约怪亟诓〉姆⒉。颐窍扔镁酆厦噶反应,序列特异性引物疭姆椒ㄑ芯縆基因多态性与姆⒉∈欠裼泄亓#辉儆昧魇较胞仪检测肿釉谡H巳汉脱G逡跣约怪亟诓』颊咄庵苎A馨拖赴上的表达情况。.,礁黾倩騅和的频率较对照组明显升高,渌鱇基因频率无明显差异。比较例粜許患者和例随机健康个体的外周血中赴保±榈钠骄泶锫扔胝W灾.=峁崾綤基因与姆⑸赡艽嬖诟合喙兀±组外周血淋巴细胞高表达肿涌赡芊从沉艘恢植±碜刺首先克隆了瓸和三个基因的,分别将其转染入不表达胞对狟分子表达的细胞的杀伤活性。结果±槟诤驼6哉组内均显示虰抗原表达于细胞后,能阻断细胞毒活性,而荒茏瓒螻赴拘裕皇褂谜攵訬赴芴錕的单抗獗细胞后,此抑制效应大部分消失。我们比较病例组和正常组之间细胞分别对、、虰细胞的杀伤效应,结果显示两组外周血细胞对细胞、转染和肿拥腒赴亩拘跃尴灾.。,⒊,虽然未达到显著水平的差异,但显示了一定程度的偏低丘洛第二蜃斜大学傍士论支捕至/
第四部分三个瓸分子对细胞因子分泌及表面受体表达的影响。抑制细胞的杀伤效应,而表达肿佣訬赴鄙斯δ芪廾飨杂响:同时提示粜缘腟患者体内,外周血细胞毒活性偏低。为了进一步了解三个肿釉诿庖吖δ艿鹘诜矫娴牟钜煨裕颐欠治隽狟,泶镌贙赴砻婧螅酝庵苎5ジ龊讼赴置贗~蚑—挠跋欤徊⒀芯客庵苎A馨拖赴肫涮烊话邢赴鸎才嘌∈焙螅珻双阳性细胞数和细胞数变化情况;而且比较外周血淋巴细胞分别与表达狟和的细胞培养小时后,粜韵赴蚄赴那榭觥=峁允綡术—肿能显著抑制外周血单个核细胞分泌蕉訲蚍置诘挠跋觳幌灾欢狟表达于细胞后,均不能影响獃、猀分泌。夕苎A馨拖胞与细胞共同培养后,细胞数,细胞数均有明显增加。与表达腒赴啾龋泶颒的细胞与外周血淋巴细胞作用后细胞数,细胞数均有明显下降。结果说明狟分子具有抑制细胞分泌细胞因子的活性,而狟分子不能明显抑制细胞因子的分泌;细胞杀伤靶细胞时,活化性受体表达上调后会伴有抑制性受体纳系鳎籋分子表达在细胞后,可下调其受体谋泶铮卑橛蠧谋泶锵碌鳌通过上述研究表明,等位基