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论
文
二0 年月
同型半胱氨酸致血管内皮细胞损伤机制的研究中文摘要博士研究生:张霁指导教师;侯一平教授研究背景与目的:同型半胱氨酸琀且恢趾氨基酸,体内不能合成,只能来源于蛋氨酸的分解代谢,在体内主要以蛋白结合形式存在。其生理作用主要是参与体内一碳单位的代谢。目前公认,体内ǘ壬呤堑贾滦难9芗膊〉亩懒⑽O找蛩刂弧R虼耍对同型半胱氨酸在各种心脑血管疾病发病机制中所发挥作用的深入研究具有重要的理论和应用价值。研究表明,匝9苣谄は赴乃鹕俗用是其致病机制的始动因素。但谄に鹕嘶频难芯棵挥械贸鲆桓系统的有说服力的结论。本次研究的主耍目的是利用蛋白质组学研究的理论和技术,对饔煤蟮娜似昃猜瞿谄は赴的蛋白质表达谱进行观察和分析,寻找与饔孟喙氐牡鞍字矢谋洌娴牧解鸬南赴诠δ艿鞍椎谋浠狧致血管内皮损伤机制的研究提供新的数据。材料与方法:运用流式细胞技术对饔煤蟮腍进行细胞凋亡检测:用凋亡相关基因芯片技术获得饔煤蟮腍凋亡相关基因表达谱,利用、对其结果进行验证,全面分析盏佳9苣谄は赴蛲龅男藕磐罚徊捎际趼废叨饔孟碌腍蛋白质表达谱进行研究,并运用生物信息学数据库对饔煤蠓⑸谋涞牡鞍字式泄δ芊治龊拖嗷プ饔梅治觥四川大学博士研究生学位论文第彻页
结论;综合凋亡相关基因表达谱和蛋白质表达谱的研究结果进行分结果:饔煤罂杉觳獾降蛲鱿赴拇嬖冢⑶业蛲鱿赴ǘ瘸省篎相关;凋亡相关基因芯片检测结果以及、産觳饨峁砻鳎琀可以诱导种凋亡相关基因表达下调,分别是:.、、、、、只虮泶锵碌鳎直鹗茿、、、、>.蛋白质表达谱分析,共鉴定出种蛋白质表达水平在饔煤蠓⑸谋洌表达下降的有:籦】、一和一个,表达升高的有:、约癮。其中,.琔和一个形尴喙毓δ苎芯勘ǖ馈>镄畔⒀菘饧焖骱拖嗷プ饔梅析发现,、母龇肿铀坪跏潜敬问笛所获得的蛋白质相互作用网络的结点。析,我们认为,在难9苣谄に鹕嘶浦校訦的诱导细胞凋亡作用为主要作用方式,并且主要是通过死亡受体通路诱导血管内皮细胞凋亡。但由于目前技术路线本身的缺陷,主要是对微量蛋白检四川火学博士研究生学位论文、、、、、、/、、、產疊、疷第彻页
出能力较低,影响了对饔霉讨锌赡苌婕暗囊恍┧彩北浠蛭⒘表达蛋白的分析。因此,尚需进行灵敏度更高的实验来完善本次实验所获得的研究结果。关键词:同型半胱氨酸;人脐静脉内皮细胞:凋亡基因表达谱蛋白表达谱四川大学博十研究生学位论文第枪页
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胱氨酸血症与动脉粥样硬化⒐谛牟‘、脑血管病变】、糖尿病性肌细胞增生【薄诱导增殖的信号转导通路可能与甈同型半胱氨酸是一种含硫氨基酸,体内不能合成,只能来源于蛋氨酸的分解代谢,主要以蛋白结合形式存在于体内。同型半胱氨酸的生理作用是参与体内一碳单位代谢,并在体内甲基转移过程中发挥作用。可在甲基转移酶、亚甲基四氢叶酸降解酶、叶酸以及胆碱等的参与下,将来源于食物的四碳氨基酸转变为三碳氨基酸;也可以再甲基化形成蛋氨酸。正常人体内同型半胱氨酸含量极低,而在一些遗传性疾病、代谢性疾病、心脑血管疾病以及慢性肾脏疾病中会显著增高,称高同型半胱氨酸血症⋯。年状翁岢龈咄桶腚装彼嵫V⒂攵鲋嘌化有关【。世纪年代以后,国内外学者的大量研究表明,高同型半血管病变⒗夏瓿沾糁⒚飨韵喙豒6嗍д呷衔#桶腚装彼浓度升高可以作为导致心血管疾病的独立危险因素之一。因此,对嗣型半胱氨酸在各种心脑血管疾病发生发展过程中所发挥作用的深入研究具有重要的理论和应用价值。目前有关同型半胱氨酸的研究主要集中在以下几个方面:桶腚装彼岫阅谄は赴乃鹕俗饔醚芯俊4罅垦芯勘ǜ姹砻鳎同型半胱氨酸可以导致体外培养的内皮细胞形态学发生改变【浚⑶铱以明显抑制内皮细胞的生长和增殖,此过程可能与、前列腺素⒛谄に⒕奘上赴仔缘鞍譏·白榘返生物分子有关。匝9芷交∠赴乃鹕俗饔谩可以促进平滑肌细胞由诮雜期,电镜检查可见平滑肌细胞肿胀,内质网扩张,线粒体水肿,溶酶体增多。说明同型半胱氨酸可以促进血管平滑四川大学博士研究生学位论文月舌、第彻页
坑貌钜煜允炯际踅械难芯浚灰约袄钣碌取吭。氪澄O找蛩叵嗷プ饔玫难芯俊E分薜腃计划㈣的研活化途径有关;并可通过促进胞内细胞周期蛋白和表达及原癌基因—.表达进一步促进的增殖究结果表明,高同型半胱氨酸血症与传统危险因素如吸烟、商赢压、胆固醇升高等存在很强的协同作用。桶腚装彼嵯喙卮幻秆芯俊囱羌谆那庖端嵬亚饷福峭桶腚装彼崽迥诖坏墓丶福其活性直接关系到体内同型半胱氨酸水平。研究表明,虻患罨浠肫