文档介绍：柴胡皂甙d对狼疮肾炎的治疗作用
【摘要】目的:观察柴胡皂甙d (SSd)对NZBWF1狼疮肾炎小鼠的疗效. 方法:20只雌性NZBWF1小鼠分为3组:SSd治疗Ⅰ组[n=8,SSd腹腔注射,2 mg/(kg·d)],SSd治疗Ⅱ组[n=6,SSd,4 mg/(kg·d)],空白对照组(n=6),共治疗6 wk. 结果:与空白对照组相比,SSd治疗组的尿蛋白含量,血清肌酐(SCr)和抗dsDNA抗体(AdsDNA)水平以及肾组织 IL6和IL10 mRNA表达降低,血清皮质酮(CS)水平升高,差异有统计学意义(P<);肾小球细胞增生、变性、渗出、硬化和足突融合现象得到改善,肾小管受损百分比降低,电子致密物沉积减少,IgG, IgA和IgM在肾小球的沉积也减少. 结论:SSd对NZBWF1狼疮肾炎小鼠有治疗作用.
【关键词】柴胡皂狼疮肾炎小鼠治疗
0引言
狼疮肾炎(lupus nephritis, LN)的治疗一直是医学上的一大难题,目前尚无理想的治疗方法. 柴胡皂甙d(Saikosaponind, SSd)是从中药柴胡中提取的主要活性成分,有糖皮质激素(GC)样甾环结构,国内外很多研究表明其具有抗炎、免疫抑制和免疫调节作用[1-2]. 本研究应用SSd治疗NZBWF1自发LN小鼠, 研究其对LN小鼠的治疗作用及可能的作用机制.
1材料和方法
LN小鼠20只,18 wk龄,体质量25~30 g,由南京大学模式动物研究所暨国家遗传工程小鼠资源库购进,实验动物质量合格证号0010551,实验动物使用许可证号SCXK(苏)2005
0002. 饲养于中山大学实验动物中心层流柜中. SSd购自昆明风山渐医药研究有限公司,于中山大学测试中心用高效液相色谱法(HPLC)%;小鼠血清皮质酮(CS)ELISA试剂盒购自美国ADL公司;小鼠血清抗dsDNA ELISA试剂盒购自美国ADI公司;逆转录试剂盒和Marker购自Fermentas公司;抗小鼠IgA(α链特异性)、IgG(γ链特异性)和IgM(μ链特异性)异硫氰酸荧光素(FITC)直接免疫荧光抗体均购自美国Sigma公司.
:SSd治疗Ⅰ组[n=8,SSd腹腔注射,剂量2 mg/(kg·d), g/L]; SSd治疗Ⅱ组[n=6,4 mg/(kg·d), g/L];空白对照组[Ⅲ组,n=6, 腹腔注射无菌生理盐水10 mL/(kg·d)]. 于实验第6周末处死3组全部小鼠,取血及肾组织标本.
,4,6周末,收集各组小鼠尿液,用考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量(mg/L);自动生化分析仪测定血清肌酐(SCr) (μmol/L);酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清皮质酮(CS) (nmol/L);ELISA测定血清抗dsDNA抗体(AdsDNA) (A450 nm).
, PAS染色,光镜观察肾组织病变情况,对肾小球和肾小管损伤程度进行评分[3]: 每例肾组织观察20个肾小球横断面,对每个肾小球进行半定量评分. 计算受损肾小管比例(2