文档介绍：专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离永州市第四中学陆梅芬2003年4月14日宣布人类基因组序列图完成,这标志着进入了后基因组和蛋白质组时代。人类基因组:指DNA分子所携带的全部遗传信息。蛋白质组:生物个体表达的蛋白质分子的总和。主要是对蛋白质功能的研究。本课题学****目标体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法,并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。1、主要概念:①凝胶色谱法②电泳法③缓冲溶液④它们在血红蛋白的提取中分别起到什么作用。:①凝胶色谱法分离蛋白质的原理②电泳法分离样品的原理③缓冲溶液的组成和作用机理3、课题重点:凝胶色谱法的原理和方法。4、课题难点:①样品的预处理②色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。血液血浆水分固体物质:血浆蛋白、无机盐、磷脂、葡萄糖等。血细胞白细胞血小板红细胞(最多)血红蛋白(90%)两条α-:血液有哪些成分?:用鸡的红细胞提取DNA,用哺乳动物的红细胞提取血红蛋白的原因是什么?鸡的红细胞具有细胞核,含有DNA,便于进行DNA的提取;哺乳动物的红细胞无细胞核,结构简单,血红蛋白含量丰富,便于提取血红蛋白。血红蛋白血红蛋白两条α-肽链两条β一肽链四个亚铁红素基团每个肽链环绕一个亚铁血红素基团,此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳,血红蛋白因含有血红素而呈红色。血红蛋白的特点::选用一定的物理或化学的方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。:根据蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等,可以用来分离不同种类的蛋白质。一、:使微生物的蛋白质发生变性、蛋白质的空间结构被破坏。(一)凝胶色谱法(分配色谱法):大多数凝胶是由多糖类化合物(如葡聚糖或琼脂糖)构成的多孔小球体,内部有许多贯穿的通道。根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的大小,利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,来进行分离。:—分子筛效应①当相对分子量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;②而相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。③依据的特性是:蛋白质分子量的大小。(二):在一定的范围内,凡是能够抵制外加少量强酸或强碱的影响使原来溶液PH值基本保持不变的混合溶液。能够抵制外界的酸和碱对溶液PH值的影响,维持PH基本不变。::通常由1-2种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同PH范围内使用的缓冲液。:在本课题中使用的缓冲液是:__________,其目的是:利用缓冲液模拟细胞内的PH环境,保证血红蛋白的正常结构和功能,便于观察(红色)和科学研究(活性)。磷酸缓冲液