文档介绍:年月基础医学与临床
第卷第期. .
文章编号:——短篇综述
基因工程技术在生物制药领域的应用和发展
赵立希,孙晶晶,蒋永平
.中国医学科学院北京协和医学院苏州方舟生物医药研发中心,江苏苏州;
.张家界市第二人民医院,湖南张家界
摘要:本文简述了近年来基因工程在生物制药技术的发展和应用。其中主要从基因操作中大分子的分离、技
术、基因芯片、外源基因的表达这个方面叙述基因工程相关技术的应用和发展,以及基因工程药物的产业化现状
与发展趋势。
关键词:技术;基因芯片;外源基因的表达;产业化
中图分类号: 文献标志码:
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基因工程制药是指按照人们的意图,将外源基
基因操作技术
因整合入宿主基因组中,表达具有生物学活性的蛋
白药物。基因工程制药的快速发展开发了一系列针基因大分子的分离主要指质粒
对疑难病症的工程药物,极大程度地改善了人们的和基因组的分离。质粒分离的常用方法有碱
生活品质。本文从基因操作中大分子的分离、变性抽提法、煮沸法、去污剂裂解法、质粒释放
技术、基因芯片、外源基因的表达这个方面叙述基法、酸酚法等。质粒在基因工程中最常用来做成各
因工程相关技术的应用和发展,以及基因工程药物种克隆载体或表达载体
的产业化现状与发展趋势。。质粒载体还可用于干扰—
收稿日期:——修回日期:——
基金项目:江苏省高技术研究计划医药资助
通信作者:.
. 基础医学与临床
的研究】由于这一技术的研究和应用,美用机制;二是用于研究药物毒理,从表达谱的改变和
,便可分析药物毒理;三是用于药物筛选,
士获得了年度的诺贝尔生理学或医学奖。基利用用药前后表达谱的改变,通过分析病理、生理、
、基因文库生化原理,能高效地筛选出新的药物或先导化合物。
、杂交以及扩增技术等。导人宿主细胞的外源基因,通过基因表达得到相
其中基因文库是指含有某种生物基因组不同基因片应的蛋白质产物。根据宿主细胞的不同可分为原核
段的一群重组体克隆,包括文库—细胞表达系统和真核细胞表达系统。在外源基因表
,和基因组达时,通常把一个报告蛋白的基因与一个目的蛋白的
文库。最近又有研究者利用名为基因融合在一起,形成融合蛋白,用于目的蛋白的检
.的小分子建立非扩增的单细测与纯化。常用的报告蛋白有一半乳糖苷酶——
胞文库。、谷胱甘肽转移酶—
聚合酶链式反应, ,、绿色荧光蛋白,
是一种在体外模拟天然复制过程的核酸以及硫氧还蛋白,等。其中值
扩增技术。该法由等人于年发明,并于得一提的是,年月有位科学家因此获得
年获得了诺贝尔化学奖。技术可分为定诺贝尔化学奖:日本科学家、美国科
性和定量。定性技术包括:反转录学家、美籍华人科学家钱永健。除了直
,,是从非常接标记目的蛋白用于检测与纯化外,还可利用某些
少量的样品构建大容量文库的方法, 具有荧光共振能量转移
;多重,的现象,用于蛋白质折叠、蛋
,、信号转导通路等方面