文档介绍：盟蝤压佥邕西旦擅选董功篮盍知基因庄酎蕴基:芒盔答辩委员会成员:毯面羞论文题目:论文答辩日期:
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临床分离菌质粒携带功能未知基因库耐药基因研究中文摘要方法结果蒙镄畔⒓际醵詎基因的功能进行预测,发现其与门甜桓温卅『医学院硕士学位论文目的本文在本课题组往届硕士研究生的对临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌筛选出临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒携带的功能未知基因,克隆候选基因并通过药物敏感性实验验证基因的功能;进一步调查耐药性相关基因在临床分离病原菌如肺炎克雷伯氏菌、柠檬酸杆菌、阴沟肠杆菌、志贺氏菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌中的分布情况,为下一步系统研究临床分离病原菌的耐药性形成及播散机制打下实验基础。对临床分离的大肠杆菌和肺炎克雷伯氏菌各自的混合质粒进行测序,用生物信息学技术筛选出功能未知基因序列峙ざ取和预测耐药性相关基因。克隆这些潜在的耐药性相关基因,并连接到载体,转化宿主菌Mü碇荻认∈头ń心鸵┬曰蛏秆。竦镁哂心鸵┬功能的基因。同时通过椒ㄑ芯空庑┗蛟诹俅卜掷刖械姆植记榭黾捌在大肠杆菌中的分布随年份的变化规律。通过改变的浓度、诱导时间和诱导温度等对这些耐药基因的诱导表达条件进行优化。最后对这些耐药基因的进化关系、保守区域、可能的功能、跨膜区域进行预测,根据预测结果对其可能的耐性机制提出假设。颐浅晒菇个功能未知基因的克隆和表达载体质粒。ü碇荻认∈头ǎ颐浅晒Φ厣秆〕隽司鸥瞿鸵┬曰颍籲渲衝蚨运幕匪鼐哂薪细叩哪鸵┬裕月霉素和氟苯尼考具有较弱的耐药性。年到年分离的大肠杆菌中的分布情况。用生物信息技术预测了基因增即皂∞产物的保守区域、跨膜区域以及可能功能等等。耐氯霉素和氟苯尼考基因叨韧矗玀结果显示该基因对氯霉素和氟混合质粒测序分析的基础上,和几位本科毕业实习生一起,应用基因组信息技术,竦昧薾蛟诹俅卜掷氩≡械姆植记榭觯约案没蛟
产物虽然与己知功能的伽虮冉现挥形甯鲭椿岬牟结论关键词:。⒘俅卜掷刖柿Pδ芪粗;蚩庵械木笫虿痪弑改鸵┬裕蚪仅只有低水平的耐药性。⒕鸥瞿鸵┬曰蛟诖蟪Ω司械难粜月式细撸谄渌钢至俅卜掷胂妇基因在临床分离菌中的阳性率较低,在鲍曼动杆菌和铜绿假单胞菌中甚至未检出该基因,结合进化分析结果,基因赡芷鹪从大肠杆菌。异,但是两者的耐药性却截然不同。不同菌株来源的中形成了序列的差异,以至于对氯霉素的耐药性上有较大差异。温州窖г核妒垦宦畚苯尼考仅仅只有较弱的耐药性,而对四环素具有较高耐药性。基的阳性率非常的低。⒒騨在进化过程
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温州医学院硕士学位论文曲施,,簉,甤琤.,.;籪籶;—:.甌甤琣,猠畃甤瑂
二十世纪以来,抗生素的大量使用使人类的发病率和死亡率大大下降,人类的寿命因此得到了延长。自青霉素作为第一种抗生素被人类发现以来⋯,人类在不断地寻找和制造新的抗生素。根据作用机制的不同,抗生索可分为以一啵被擒绽啵纾呵齑竺顾亍⑼撞济顾亍⒘疵顾亍⒚卓ū诘龋、邗0类,如:青霉素、头孢霉紊、头霉素、单内酰环类、邗C敢种萍烈约凹籽青霉素类等:⒋蠡纺邗ダ啵纾缓烀顾亍酌顾吉他霉素⒙藓烀刮伞奇霉索、克拉霉素、乙酰螺旋霉索、麦迪霉素、交沙霉素等;⒙让顾乩啵括氯霉素、甲砜霉素等;⑺幕匪乩啵ㄋ幕匪亍⑼撩顾强力霉素⒔鹈素等;⒘挚甚0防啵纾嚎肆置顾亍⒘挚擅顾氐龋、多肽类,比如万古霉素:⒖拐婢股兀纾夯一泼顾亍⒘叫悦顾谺等;⒖怪琢隹股兀丝裂霉素、放线菌素⒉├趁顾亍⒚顾氐龋⒕哂忻庖咭种谱饔玫目股兀但是,随着抗生素在临床疾病治疗中的广泛应用,对抗菌药物有很强耐受性的细菌也随之出现。超级细菌,泛指临床上出现的多种耐药菌,。高耐药性不仅存在于人体内的病菌中,我们生活环境中的细菌也是如此。细菌可咀通过许多种机制逃避抗生素的抑带饔茫饕S幸韵录钢郑篒、改变细菌细胞壁的渗透性阻止抗生素或其它药物到达它们的作用靶位:⒉馀疟玫然平ǹ股氐药物排到胞外:⒉芄恍奘慰股胤肿拥拿福佣箍股魇プ饔茫、通过降解作用使抗生素失去活性;⒊豢股刈瓒系拇煌揪锻猓ü渌代谢途径使抗生素失去抑制作用;⒍钥股刈饔玫哪勘臧形唤行奘危、过量表达被抗生素抑制活性的酶,从而逃避抗生素的抑制作用【¨大肠杆菌且鹉虻栏腥尽⑸鲇凵鲅缀鸵皆壕V⒌鹊病原菌之一,克雷伯菌属、沙雷氏菌属、变形杆菌属、肠杆菌属以及其它需氧