文档介绍：华中农业大学
硕士学位论文
结核分枝杆菌螺旋酶A、B亚基相互作用的研究
姓名:高婷
申请学位级别:硕士
专业:预防兽医学
指导教师:郭爱珍
20090601
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摘要复制等生理功能是必需的,而人类不存在这种酶,因此螺旋酶是一个成功的抗菌只知道的碳端是与产生相互作用的功能结构域。本研究旨在确定结玤拥6私囟蹋晒菇艘幌盗械6瞬煌潭鹊娜笔澹诱饵载体,同时将完整基因连入酵母捕获载体,进行酵母双杂交试验。研在激活报告基因组氨酸表达中呈阳性反应,但是在激活报告基因肴樘筛选更为严谨,推测可能是因为的氮端截短造成了与亚基相蛭猅峁褂虬薌,所以通过重叠笔的结构域,构建缺失结构域的突变体琓,然后进行酵母双杂交试验,试验结果得出与在激活报告基因组氨酸和仄嗣腹惴捍嬖谟谏锾逑赴四冢斡肓讼赴诩负跛械腄活动,如母粗啤⒆B己突蛑刈椤⑷旧实闹刈橐约捌渌南赴砉程。菪甘峭仄艘旃姑钢形ㄒ灰恢帜芤敫撼菪拿福韵妇淖B肌药物靶标。同时,细菌对喹诺酮类的抗性是由于,的突变引起的。菪甘怯葾,腔槌傻亩此木厶澹ジ龅腁、腔痪哂腥魏催化活性,二者必须发生相互作用而重组后,才具有酶催化活性。目前为止,结核分枝杆菌螺旋酶、亚基相互作用的研究并不深入,核分枝杆菌螺旋酶和亚基产生相互作用的功能结构域,主要结果如下:玤犹级私囟蹋晒菇艘幌盗刑级瞬煌潭鹊娜笔澹、、蚲庑┢连入酵母诱饵载体,同时将完整基因连入酵母捕获载体,进行酵母双杂交试验。研究结果表明,、、、、蛋白与在激活报告基因组氨酸和肴樘擒彰副泶镏谐恃粜苑从Γ、、、、蛋白与存在相互作用,而与没有相互作用,因此,与相互作用的区域在的第个氨基酸之间。——蚲,将这些片段连入酵母究结果表明,、、、蛋白与苷酶表达中呈阴性反应。因为肴樘擒彰副ǜ婊虻纳秆”茸榘彼岜ǜ婊虻互作用的区域个氨基酸之间蛋白构象的改变,从而使某些重要相互作用位点被堵塞而使得相互作用减弱,所以在激活报告基因肴樘擒彰副泶镏谐室性反应。结核分枝杆菌螺旋酶亚基相互作用的研究
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乳糖苷酶表达中呈阴性反应,表明蛋白缺失结构域的突变体与没有相互作用,从而验证了前期的试验结论,并且能推断出结构域是、亚基产生相互作用的关键结构域。晒菇薵—..疿的表达载体,进行了蛋白质的诱导表达和纯化,为测定酶活和进行橹な匝樘峁┝瞬牧匣关键词:结核分枝杆菌;螺旋酶;拓扑异构酶;酵母双杂交;;蛋白质相互作用华中农业大学硕士学位论文
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衍毳叫·学位论文作者签名:南寿研究生签名:高鹰签名日期:钐√辍翴弓药时间:如纭拢签名日期:年‘月乃日华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书如需保密,解密时间年月独创性声明学位论文使用授权书日本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究骷叭〉,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,,、使用学位论文的规定,即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存提交论文的印刷版和电子版,并提供目录检索和阅览服务,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、,传播学位论文的全部或部分内容,:保密学位论文瓷婕凹际趺孛堋⑸桃得孛芑蛏昵胱ɡ惹痹谛枰L峤槐C艿穆文诮饷芎笫视糜诒臼谌ㄊ椋导师签名:学位论文是否保密注:请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间’
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南鬃凼我国结核病现状颍既虻%,位居全球第二位,是全球个结核病高负担国家之一。新的挑战。虽然我国结核病控制已经取得了举世瞩目的成效,实现了全球结核病千年发展目标,仍然面临许多困难和障碍挛桑。病的发生对结核病控制规划的实施构成严重的威胁仍将是下一世纪严重危及人类健康的疾病,移民、腥竞湍鸵┦兰腿结核病是慢性传染性疾病。目前,全球已有亿人感染结核菌,活动性结核患者数达万,每年新发结核患者达颍万人因结核病死亡。年世界卫生组织肌叭蚪岷瞬〈τ诮艏弊刺,将结核病列为重点控制的传染病之一。年,俅沃赋觥岸糁平岷瞬⌒卸滩容缓据耆蚪岷瞬】刂票ǜ婀兰疲晡夜岷瞬》⒉∪耸年全国结核病流行病学抽样调查结果显示,我国结核病疫情特点是:感染人数多,全均感染水平;患者数多,全国有活动性肺结核患者约蛉耍渲写拘苑谓岷嘶颊咴万