文档介绍：天津医科大学
硕士学位论文
黄芩苷的抗结核分枝杆菌作用机制的研究
姓名:周清
申请学位级别:硕士
专业:临床医学;内科学;呼吸系病
指导教师:吴琦
2012-05
中文摘要白世纪年代结核病疫情重新上升,成为近年来最为重要的传染病,耐药菌株流行是结核疫情日趋严重的主要原因,与腥炯翱菇岷艘┪锸褂不当、治疗不合理、患者依从性差等有关,使抗结核化疗药物面临严峻挑战。近年来抗结核中药领域研究较多,已开发出多种抗结核中药,不易产生耐药且毒副作用小。有实验证实黄芩苷有广泛的抗菌谱,但尚未有报道其对结核分枝杆菌是否有抑菌作用,故本实验针对结核化疗药物毒副作用大且耐药严重等问题,通过对黄芩苷体外抑菌试验及电子显微镜观察黄芩苷作用前后结核分枝杆菌的细胞形态学变化,探讨黄芩苷的抗结核分枝杆菌的作用及作用机制,为临床开发新的抗结核药提供理论基础。方法:试验通过制备改良罗氏培养基,配制浓度梯度为/、/、./、/的含黄芩苷的培养基,并将临床结核菌株接种于不同浓度的含药培养基中,通过体外。孪浞跤周后,观察中药黄芩苷在不同浓度梯度下对结核分枝杆菌的抑菌作用,利用绝对浓度梯度法判断结果,以培养皿无菌落生长的最低药物浓度为黄芩苷对该菌株的最低抑菌浓度⒓扑阋┪锒ゾ甑腗ゾ甑腗V票覆缓┑目瞻着嘌秃胁煌琈浓度黄芩苷的改良罗氏培养基,接种临床菌株后,通过体外。孪浞跤周后,取正常结核分枝杆菌及不同抑菌浓度的黄芩苷作用后的结核分枝杆菌,经离心漂洗、固定、包埋、切片、双染色后通过投射电子显微镜观察黄芩苷作用前后结核分枝杆菌的细胞形态学变化。仕甲中药黄芩苷体外抑菌试验显示:株临床结核菌株中,昃腗大于/,故痬%计数;昃腗为/,占株菌的/,占.%:株菌的/,占.%;昃腗为/,占ァ在痬段诘木晔ィ./范围内的菌株数占.%,其中痬幕栖塑账急壤很接近痬幕栖塑张ǘ人急壤/的黄芩苷浓度所占比例最大。天津医科大学硕士学位论文目的:ィ耋口:
关键词:黄芩苷结核分枝杆菌体外抑菌最低抑菌浓度电子显微镜说明在体外抑菌试验中,痬幕栖塑张ǘ忍跫戮蠖嗍俅步岷朔种Ω菌可被抑制。取不同抑菌浓度的黄芩苷作用后的结核分枝杆菌及空白培养基生长的正常结核分枝杆菌,经处理后通过电子显微镜观察黄芩苷作用前后结核分枝杆菌的细胞形态学变化,发现:通过投射电子显微镜可以清楚地观察到结核分枝杆菌的正常形态和内部结构。随着黄芩苷浓度的增加结核菌逐渐皱缩变形直至降解,菌壁及胞膜逐步部分或全部降解,部分胞质浓缩或疏散,电子密度降低,丝状АV时所有结核杆菌形态均不正常,整个杆菌结构模糊不清,菌壁消失,胞膜部分或全部降解,核糖体颗粒很少见,见不到丝状糠趾酥逝ň郏缱用芏缺涞汀结论:通过体外抑菌试验发现黄芩苷对临床株结核分枝杆菌均有抑制作用,,结果提示随着黄芩苷浓度加大,结核分枝杆菌受损程度加重,受损结核杆菌数量增多,以细胞膜及细胞壁破坏最为明显,提示其抑菌作用可能是由于细胞壁、细胞膜结构的破坏而导致细菌菌体的裂解死亡,从而达到抑菌杀菌作用。天津医科大学硕士学位论文/。
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研究现状、成果刖吾结核病是一种古老的传染病,年德国科学家首次发现并证明结核病的致病菌是结核分枝杆菌了结核病研究的新时代。近年来发达国家及发展中国家都出现了结核病流行的大回升,全世界有约的人口感染了潜在状态的结核分枝杆菌,每年死亡人数高达颉W兰甏唇岷瞬∫咔橹匦律仙晌=昀醋钗V要的传染病,耐药菌株流行是结核疫情日趋严重的主要原因耐多药结核病,,掀起了结核病第问澜缌餍懈叻【,对全球公共卫生安全构成了严重威胁,大大增加了全球结核病控制的负担。据柿舷允荆泄钟械哪徒岷瞬』颊呷耸既プ笥遥侨结核病患者第二大国,也是耐药程度最高的国家之一,耐药结核菌株的出现已成为一个严重的公众健康问题【】。—年全国结核病耐药基线调查显示:我国肺结核病人中耐多药率ィ惴耗鸵┞.%。据估算,我国每年新发耐多药肺结核患者万例,而人员迁移流动、城市居住条件拥挤等现状加剧它耐药结核病和欢显黾酉趿怂拗鞯募膊》烙低常率骨弊刺【复苏或感染易