文档介绍：中山大学
博士学位论文
人骨髓间质干细胞调控肝星状细胞的体外研究
姓名:胡昆鹏
申请学位级别:博士
专业:外科学
指导教师:许瑞云
20100528
人骨髓间质干细胞调控肝星状细胞的体外研究摘要愈这一顽疾带来了希望。蚐从肝硬化小鼠尾静脉注灿,证实能博士生:胡昆鹏导师:许瑞云教授中山大学附属第三医院肝胆外科广州专业:外科学研究目的和意义但闷壁是:丛望星垫值蕉垤揎赶红维丝往题鲍喔肝纤维化是一种严重危害人类身心健康的疾病,至今没有公认有效的治疗方法。因此,探索切实可行的治疗方案,其意义非常重大。既往的治疗多集中在抑制肝脏炎症反应和免疫反应上,现今已逐渐转向采取以肝星状细胞琀0斜甑闹瘟撇呗浴4罅垦芯恐な担琀的异常激活并最终导致细胞外基质在肝内过量积聚,是肝纤维化发生的中心环节。抑制鲋或促进其凋亡、抑制其分泌细胞外基质或促进细胞外基质降解,是治愈肝纤维化的关键。应用干扰素或肝细胞生长因子抑罨挥τ妹咕徊颎诱导蛲觯挥τ醚9芙粽潘刈;敢种萍烈分泌胶原等⋯⋯但研究结果证明,多数药物或细胞因子的疗效都不明显;有的虽有疗效,但由于副作用太大而近年来,有关骨髓间质干细胞琈难芯扛改善肝功能并使肝纤维化减轻。捎肕对斡不颊呤凳┦匝樾灾瘟疲发现肝功能均明显好转。本课题组同期进行的类似研究ㄊ笛檠芯亢土俅彩验仓な盗松鲜鼋崧邸U庑┚崾綧移植可望成为治疗肝纤维化的有效方法。早期的研究曾认为瘟聘蜗宋幕碇饕J峭ü只8蜗赴⑿薷针对如何诱导蛲龊鸵种破浠罨改昀矗谕饨辛诵矶喑⑹裕喝无法应用于临床。中山大学博士学位论文Ⅱ
%提高到.%。这提示我们,鳖￡亘篚逼过:差坌塑扭剑::逦撞竖￡岬亟坚堡鳆擅堕:透昱蔓煎塑圭:剪遢堇纱匝憧Ρ漪鸬侵共轶:丛遁蕉垤选旺塑刍睢晷遣榛ネ戈臜錾凋圭塑地剑竖￡活丝喔杂鉋星查查丛墨￡通过差盆婆扭剑调控玤趁遭猩史起佳旦喔榇酝萁妒晔躺还直噬肝损伤,但更多的研究结果并不支持这一观点,多数实验并未能找蛰分化为肝细胞的证据。而前期实验中我们发现,植入的畛跏欠茄≡裥缘胤植荚诨体各组织中,随后选择性地在肝组织中聚集并长期存活。而且,姆植疾课多集中在纤维组织附近,而并非肝实质细胞位置;同时,我们利用小鼠源性与⒐才嘌逑担⑾諱/才嘌蛘咴贖培养基中加入跫养液均可抑的增殖,且抑制程度随培养时间的延长而增强,大量蒘期进入冢渲蠸期细胞由.%。芊置诙嘀窒赴蜃包括神经生长因子、肝细胞生长因子、血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、,是研究的关键所在。难芯恐な礛能够分泌神经生长因子外诱导⑸蛲觥些因子和通路参与墓虫喔为了回答上述问题,本课题拟通过建立“人際体外共培养体系’’,对该“旁分泌机制鼋徊窖芯浚孩偻ü魇较赴酢⒚庖哂〖5燃际跹芯縈是否诱导蛲觯种破浠罨虎谕ü齊⒚庖哂〖<爸泻涂固宓方法研究贛调控讨械淖饔茫虎鄄捎没蛐酒际跎秆」才嘌逑中系鞯南喙氐蛲龌颍治銎渌赡茉贛诱导蛲龉讨衅鹱饔玫囊子或细胞通路。从而揭示訦的调控作用及机制,初步阐明垢蜗宋赋鯪能够在体的机理。中山大学博士学位论文琓
第一部分訦调控作用的体外观察一材料与方法二结果赴丛せ钚腿薍猩酱笱笛槎镏行。薒一肝细胞株猩酱笱笛槎镏行。薓:采自中山大学附属第三医院临床无血液疾病志愿者髂骨内骨髓,/才嘌逑档慕利用孔径为半透膜,在装逯薪⒎墙哟ス才养体系。其中魑E嘌逑瞪喜悖又值代课培养体系下层为姿芰吓嘌澹又值代的恳辔V于%⒈ズ褪6鹊呐嘌涑9媾嘌嘌何%,本实验通过测定范℉是否为活化状态。魇较赴跫觳庀赴蛲不同组别ü占⒋砗螅肞双染法进行流式细胞术,检测其凋亡情况。庖哂〖7ḿ觳怃布《鞍不同组别ü占⒋砗螅庖哂〖7ḿ觳飧髯閍表达情况,并进行对比分析。臣蒲Х治所有计量资料以均数标准差±表示,应用软件处理,。罨琀有发育良好的应力纤维,胞浆内缺乏脂肪滴,免疫组化染色可见活性染色的挥诎誓冢矢哒帕ο宋捶植肌共例行例、女性。膖中山大学博士学位论文.
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