文档介绍：争业名称⋯⋯~堂塑:墨逊鱼壹~⋯⋯纠硕士学位论文野桑蚕细胞色素虻幕蔷锣可彰弧ā凰二曼釜一⋯⋯一~一一。生理生态与分子生物学年指导教师姓名沈教授》研究方扁沧筻提交目期谨’
中文摘要缈赐垓聊探针,通过点杂交的办法尝试进行了虮泶锏淖橹特异性引物,通过—至蕉卫┰隽艘吧2系腃基因;通过拼缴希吧2螩蛴爰也螩虻耐葱源哇%,而马氏管、体壁中有特异性转录。。很多证据表明,昆虫细胞色素酶系介导的代谢抗性是大多数昆虫产生抗性和对寄主植物适应性的主要机制。以氟化物诱导的野桑蚕中肠组织为基础材料,根据家蚕基因序列设计接获得了完整颉2庑蚪峁允荆吧2螩虻腛为,编码哂邢赴豍鞍椎墓餐卣鳌M葱苑治霰砻鳎推导的氮基酸序列则完全一致。通过中家蚕基因组数据库查询、比对和拼接,预测野桑蚕基因结构中至少含有瞿诤瑁夷诤右煌庀宰又涞牧接符合ㄔ颉将吲的序列克隧迸原核菇嗽吮泶镏柿#僮化到大肠杆菌细胞中,通过诱导表达。、分析表明,带有标签的重组蛋白的分予量为笥遥肜砺壑迪符。为通过纯化蛋白,进一步构建细胞色素的体外代谢体系奠定了基础。抽提不同条件下野桑蚕的各组织总肈标记的随机引物制各了野桑蚕异性研究。初步结果显示,基因在氟化物诱导的野桑蚕中肠、脂肪体、关键词:基因克隆序列分析原核表达组织表达定位作者:陈玉华指导老师:沈卫德蚶桑蛩绑釉也索壮膡中立摘要
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畔导师签名:——日研究生签名:哩壅窆坐日期:乏竺￡￡垒苏州大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明学位论文使用授权声明日期:色丝￡互研究生签名:本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。苏州大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、清华大学论文合作部、中国社科院文献信息情报中心有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外,’允许论文被查阅和借阅,可以公布ǹ论文的全部或部分内容。论文的公布ǹ授权苏州大学学位办办理。期
刖许多外来物质背婕痢⒒肪澄镏实和内源物质に亍⒅舅岬的代谢,关系昆虫体内,细胞色素酶系对植物毒素的代谢,是昆虫对寄主植物适应性的主要繁多的分型。从蛋白质研究的角度,来纯化、分型和鉴定昆虫代谢内源物质或导致昆虫对寄主适应性及抗药性的特异性细胞色素,代价昂贵而且还存在着很多其他一直滞焉于人类及其他哺乳动物。舌细胞色素是一簇结构、性质相似而又有差异,分子量在~剩由基因超家族编码的含血红素和硫羟基的结合蛋白。其重要的特征是还原型细胞色素与结合形成的复合物,在波长处有最大的特征性吸收峰峰O胞色素命名正是由来于此。细胞色素广泛地存在于包括人在内的所有动物、植物和微生物之中,参与到昆虫的生长发育及对环境的适应,具有重要的生物学和进化意义。许多事例表明在机制;而细胞色素酶系对杀虫剂、环境化学物质氧化代谢,则是昆虫产生抗药性的普遍机制。正由于细胞色素在生物体中具有如此重要的生理代谢和防御等作用,因而越来越受到了研究人员的重视。自年,细胞色素作为氧化酶的功能被阐明以后,这一血红蛋白的研究发展很快。近年来,每年公开发表的有关细胞色素的文章更是超过余篇。但是由于昆虫体内,细胞色素蛋白的总量很微少、极不稳定且存在着种类困难。这大大阻碍了昆虫细胞色素的深入了解,所以昆虫细胞色素的研究而自世纪八十年代以来,随着分子生物学、基因组学和生物信息学的飞速发展,从分子水平上来鉴定各种特异性乇鹗怯肜コ婵剐韵喙细胞色素,并逐步揭示细胞色素介导抗性的遗传基础,已经成为研究细胞色素的另外一条捷径。近年来,以家蝇、果蝇、北美尾凤蛱和冈比亚按蚊等为模型的昆虫细胞色素研究已经逐步深入肿铀健D壳埃蜃檠в肷镄畔⒀У难芯吭测表明,果蝇有个不同的细胞色素基因,而冈比亚按蚊有觯也显蛴个之多,等等。因此,我们完全可以利用分子生物学的手段和基因组学、分子生野桑蚕绑胞色素基因的研究刖带
物学的研究成果,短期内克隆出昆虫乇鹣蠊⒏员然“次谩⒓也系纫丫5廊基因组序列的昆虫母髦窒赴豍颉Mü詊用异源原核或真核表达系统表达出昆虫的抗性相关细胞色素蛋白,构建细胞色素的体外反应体系,来研究细胞色素功能的特异性及与昆虫抗性的关系;或通过转基因的手段,来研究细胞色素功能,并选育和培育出新型抗性品种。本研究正是基于家