文档介绍：J_0025 光栅型荧光分光光度方法通则 1. 光栅型荧光分光光度方法通则的说明编号 JY/T 025—1996 名称( 中文) 光栅型荧光分光光度方法通则( 英文) General rules for grating fluorescence spectrophotometry 归口单位国家教育委员会起草单位国家教育委员会主要起草人田笠卿批准日期 1997 年 1 月 22 日实施日期 1997 年 4 月 1 日替代规程号无适用范围本通则规定了一般样品(液体、固体)中的金属和有机成分的荧光分光光度分析方法,适用于食品、卫生、农业、环境等方面的一些样品分析。主要技术要求 1. 定义 2. 方法原理 3. 试剂和材料 4. 仪器 5. 样品 6. 分析步骤 7. 分析结果的表述是否分级无检定周期( 年) 附录数目 1 出版单位科学技术文献出版社检定用标准物质相关技术文件备注 2. 光栅型荧光分光光度方法通则的摘要本通则规定了一般样品( 液体、固体) 中的金属和有机成分的荧光分光光度分析方法,适用于食品、卫生、农业、环境等方面的一些样品分析。 2 定义荧光物质 fluorescence material 能显示或易察觉荧光的分子称作荧光物质,通常指具有刚性结构和平面结构的π电子共轭体系的分子或带有共轭双键的分子。荧光发射光谱E M fluorescence emission spectrum 选择某一固定波长的光激发样品,记录样品中产生的荧光发射强度与发射波长间的函数关系,即得荧光发射光谱。荧光激发光谱 E X fluorescence exitation spectrum 选定某一荧光发射波长记录荧光发射强度作为激发光波长的函数,即得荧光激发光谱。校正光谱 calibration spectrum 由于荧光测量仪器的特性,例如光源的能量分布、单色器的透射率和检测器的响应等性能会随波长而变,所以同一化合物在不同的仪器上会得到不同的光谱,且彼此间无类比性, 这种光谱称为“表观”光谱, 要使同一化合物在不同仪器上能得到具有相同特性的荧光光谱, 则需要对仪器的上述特性进行校正,经过校正后的光谱称为校正荧光光谱(亦称真正的荧光光谱)。 3 方法原理物质被某一波长的光照射后,会发射出比照射波长稍长的光,这种光称为荧光,它的过程是当物质的分子处于基态时,吸收光后,可跃迁到激发态,各激发态分子相互撞击而以无辐射能量损失的形式回到第一激发态的最低振动能级,这一振动能级的分子在返回基态时, 所发射的光称为荧光;但当它转入亚稳的三重线级,停留一段时间,返回至基态时所发出的光称为磷光,荧光(磷光)与物质浓度的关系为 F = K ’? I 0 (1 - e ε LC ) 式中 F ——荧光强度 K ’——仪器常数? ——量子效率 I 0 ——激发光强度ε——荧光物质的摩尔吸收系数 L ——荧光池厚度 C ——荧光物质浓度对于给定的物质来说,当激发光的波长、强度、荧光池厚度一定,浓度较低时,上述关系可以简写为 F = KC 即荧光强度与所测定的荧光物质浓度成比例,由此可求出所测定物质的含量。 4 试剂和材料硫酸分析纯硫酸奎宁分析纯