文档介绍：沉降菌测试方法
沉降菌测试方法
1、把ф90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。
2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养
〔2022年9月〕
药品生产质量管理标准
〔1998修订〕
φ90mm 
CFU/4ha
φ90mm 
CFU/4ha
φ90mm 
CFU/4ha
沉降菌/皿，
100
A级
＜1
A级
＜1
＜1
≤1
-
B级
≤5
B级
≤5
≤3〔1000级〕
-
10000
C级
≤50
C级
≤50
≤5
≤3
100000
D级
≤100
D级
≤100
≤50
≤10
为培养皿暴露时间不超过4h，以平均菌落数表示。
无菌检查法试验步骤
无菌检查在洁净度100级单向流空气区域内进行，其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。
1、器具灭菌：培养皿假设干个〔报纸所好〕、试管、剪刀、镊子等装入盒中置电热枯燥箱内180℃，2小时。
2、硫乙醇酸盐流体培养基〔细菌〕，根据试验实际用量取假设干培养基和蒸馏水，煮沸，摇匀，分装至适宜的容器中，瓶塞封口，灭菌。硫乙醇酸盐流体培养基置33℃培养48小时，应无菌生长。
改进马丁培养基〔真菌〕，根据试验实际用量取假设干培养基和蒸馏水，煮沸，摇匀，分装，灭菌。改进马丁培养基置24℃培养72小时，应无菌生长。
营养琼脂根据实际用量按一皿装15ml，分装几个皿来计算，灭菌。
%***化钠分装至7支试管，封口，灭菌。
3、把金黄色葡萄球菌用接种环刮一下，%***化钠试管中摇匀，作10倍系列稀释至10-7，然后从10-5、10-6、10-7试管各抽取1ml，分别放入标号5#、6#、7#培养皿里，倒入营养琼脂摇匀，〔营养琼脂不能太烫，以不烫手为准〕待营养琼脂冷却后倒置放入33
℃培养箱中培养48小时，48小时中取出观察计数，根据菌落数小于100cfu来决定用几号。
4、操作时，应用适当的消毒液对供试品外表或外包装擦拭消毒后，以无菌方法取内容物。取供试品3只接种于足以浸没供试品的适量培养基中。一只瓣膜接种于硫乙醇酸盐流体培养基中，轻轻摇动，使瓣膜与培养基混合，1支试管接种金黄色葡萄球菌对照用菌液1ml,作阳性对照，1支作空白对照。另取2只瓣膜接种于改进马丁培养基中，2支试管作空白对照。硫乙醇酸盐流体培养基置33℃培养，改进马丁置24℃培养阳性对照管培养48小时后应有菌生长。
5、结果判断：在培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。培养14天后，假设供试品管匀澄清，判供试品符合规定；假设供试品管中任何一管显浑浊并有菌生长，判供试品不符合规定。
细菌内***试验步骤：
1、准备工作：
移液管：，1ml10支
试管：10ml×4支，试管架2个〔大小〕
烧杯40ml2个，锥形瓶2个
试验所用器皿需经处理除去可能存在的外源性内***，玻璃器皿置电热枯燥箱内180℃干烤至少2小时。
细菌内***检查水10ml×4支
细菌内***工作标准品1支，每安瓿含内***10EU
鲎试剂 ×8支
同一批号3支瓣膜
浸提介质：细菌内***检查水
浸提介质体积计算公式：V==〔ml〕
×3=〔ml〕
把细菌内***检查水4支外表擦净翻开，倒入烧杯中，，用锡纸封口，放进提前翻开升温至37℃恒温培养箱中，。供试液贮存应不超过2小时。
注：V-浸提介质体积，单位为毫升〔ml〕
L-产品细菌内***限值，单位为细菌内***单位每毫升〔EV/ml〕
λ-所用鲎试剂灵敏度标示值，单位为细菌内***单位每毫升〔EV/ml〕
2、细菌内***工作标准品用细菌内***检查水1ml溶解，在旋涡混合器上混匀15分钟。
①。
②。〔阳性对照溶液〕
③。
④。〔供试品阳性对照溶液〕
3、把8支鲎试剂外表擦净全部翻开放进试管架中，***检查水，在旋涡器上