文档介绍：土壤生物化学指标测定
一、土壤脱氢酶(dehydrogenase)活性测定（比色法）
（一）分析意义脱氢酶能酶促脱氢反映，它起着氢的中间传递题的作用。在土壤中，碳
水化合物和有机酸的脱氢酶作 40ml 蒸馏水和 5ml
% H O ，塞上塞子，将三角瓶放在恒温振荡机上（25 0C）,震荡 20 分钟。而后迅速加入
2 2
5ml 3N 硫酸，以稳定未分解的过氧化氢。再将瓶中的悬液用慢速型滤纸过滤。然后，吸取
25ml 滤液，用高锰酸钾滴定至淡粉红色终点。
2、结果计算：用于滴定的、土壤滤液所消耗的高锰酸钾量为 B，用于滴定 25ml 原始过氧化
氢混合液的所消耗的高锰酸钾量为 A。
过氧化氢酶活性=(A — B)/2g — 土壤含水量
酶活性以 1g 敢图分钟内消耗高锰酸钾 ml 数表示。

三、土壤多酚氧化酶（polyhphenol oxidase）活性的测定（比色法）
（一）分析意义多酚氧化酶参与土壤有机组分中芳香族化合物的转化作用。土壤中的酚
类物质在多酚氧化酶作用下氧化生成醌。醌与氨基酸等通过一系列生物化学过长鞥
所合成最初的胡敏酸分子。所以，多酚氧化酶是腐殖化的一种媒介，他是土壤氧化
还原酶中了解的较多的一种酶。
（二）方法选择及原理在空气存在的情况下，多酚氧化酶能酶促一元酚、二元酚、三元
酚氧化成醌。根据基质的变化，测定多酚氧化酶的三种方法如下：
1、比色法：多酚氧化酶酶促邻***，用***提取生成的紫色没食子素；比色着色的
***相，用紫色没食子素表示酶活性。此种方法具有速度快的优点，闭塞技术要求
求严，培养 PH 值要准确，并且范围较窄。是目前广为应用的一种方法。
2、碘量滴定法：本法根据多酚氧化酶酶促基质生成的醌，在酸性条件下，用标准碘液
滴定生成稳定的蓝色络合物，以碘的体积表示酶的活性。此法要注意保证反应所需
要的酸度，对碱性土壤应加过量的酸，才易于判断滴定终点。
3、测压法：本法用 Warburg 呼吸器，测定在多酚氧化酶作用下消耗用于氧化多酚化合
物的氧量，表示酶活性。此法要求仪器设备，且测定样品所需要时间较长。测定
多酚氧化酶常用的基质有邻苯二酚和邻***，由于测定多分氧化酶是基于测定加
入土壤的多酚的演化速度，一般邻***氧化得最快，故常用邻***为基质，以
比色法进行测定。
（三）试剂配置
1、1%邻***溶液
2、***
3、盐酸
4、***钾标准溶液：取