文档介绍：
土壤酶指标测定
土壤生物化学指标测定
一、土壤脱氢酶(dehydrogenase)活性测定〔比色法〕
〔一〕分析意义脱氢酶能酶促脱氢反映，它起着氢的中间传递题的作用。在土壤中，碳
活性=(A — B)/2g — 土壤含水量
。

三、土壤多酚氧化酶〔polyhphenol oxidase〕活性的测定〔比色法〕
〔一〕分析意义多酚氧化酶参加土壤有机组分中芳香族化合物的转化作用。土壤中的酚
类物质在多酚氧化酶作用下氧化生成醌。醌与氨基酸等通过一系列生物化学过长鞥所合成最初的胡敏酸分子。所以，多酚氧化酶是腐殖化的一种媒介，他是土壤氧化复原酶中了解的较多的一种酶。

〔二〕方法选择及原理在空气存在的状况下，多酚氧化酶能酶促一元酚、二元酚、三元
酚氧化成醌。依据基质的改变，测定多酚氧化酶的三种方法如下：
1、比色法：多酚氧化酶酶促邻***，用***提取生成的紫色没食子素；比色着色的
***相，用紫色没食子素表示酶活性。此种方法具有速度快的优点，闭塞技术要求求严，造就PH值要精确，并且范围较窄。是目前广为应用的一种方法。
2、碘量滴定法：本法依据多酚氧化酶酶促基质生成的醌，在酸性条件下，用标准碘液
滴定生成稳定的蓝色络合物，以碘的体积表示酶的活性。此法要留意保证反响所须要的酸度，对碱性土壤应加过量的酸，才易于判定滴定终点。
3、测压法：本法用Warburg呼吸器，测定在多酚氧化酶作用下消耗用于氧化多酚化合
物的氧量，表示酶活性。此法要求仪器设备，且测定样品所须要时间较长。测定多酚氧化酶常用的基质有邻苯二酚和邻***，由于测定多分氧化酶是基于测定参加土壤的多酚的演化速度，一般邻***氧化得最快，故常用邻***为基质，以比色法进展测定。
〔三〕试剂配置
1、1%邻***溶液 2、***

3、
4、***钾标准溶液： K2Cr2O7 (优级纯) HCl(相当于50ml醚中含5mg紫色没食子素)
5、—磷酸缓冲液： H2O〔分子量=，〕. H2O〔分子量=，〕11ml混合而成。
〔四〕试验步骤
1、标准曲线的绘制：取0、1、3、5、7、9、11、13ml***钾标准溶液于50ml比色管中， HCl补足至35ml 制成相当于含汗0、101、300、500、700、900、1101、1300ug 没食子素的系列溶液，在分光光度计上于430nm处闭塞测定，制作标准曲线。 2、操作过程：取1g别致土样，置于101ml小口三角瓶中，—磷酸缓冲液，然后参加10ml 1% 邻***溶液，摇荡三角瓶后盖上橡胶瓶塞，并放在30 C恒温箱中造就2h。造就完毕后，参加35ml***，在恒温振荡器上振荡15
0
分钟〔25C〕，静置5分钟。最终，将含有溶解的紫色没食子素的着色***相在430nm 处进展比色。为防止因***引起的误差，每比色一次用无水乙醇洗涤比色槽一次。为了削除土壤中原油的醚溶性有机物质引起的误差及校正没食子酚的纯度，需设无土基质土壤参照和无土壤的及基质作参照，无基质的参照用水来代替。 3、结果计算：多酚氧化酶活性= 没食子素含量/1g — 土壤含水量

多酚氧化酶活性，以2 h 后1g干土紫色没食子素的含量表示。
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四、土壤过氧化物酶〔per