文档介绍：生化分析
蛋白质荧光探针
【香豆素类】
中文名称:香豆素
中文别名:氧杂茶邻酮;香豆内脂;邻氧萘酮;2H-1-苯并吡喃-2-酮;1,2-苯并吡喃酮
英文名称:Coumarin
英文别名:2H-1-Benzopyran-2-one; COUMARINE; 1-Benzopyran-2-one; 1,2-Benzopyrone; Chromen-2-one; O-Oxy-Cinnamic Lactone ; 2H-chromen-2-one
4-羟基香豆素及其衍生物
简介:
4-羟基香豆素及其衍生物是很多具有生理活性的天然产物的重要组成部分,还是很多合成工业产品包过抗凝剂、除草剂、抗癌剂和HIV蛋白酶抑制剂等有用的中间体。
(2) 光谱分析
如下图所示,以4c为例,其λex = 340 nm,λem = 408 nm
香豆素类过氧化氢荧光探针
简介:
过氧化氢是一个重要的活性氧(ROS)因子,存在活的生物体的器官中,其稳态可以有不同的生理和病理的结果,过氧化氢和其他活性氧氧化剂之间的平衡与许多疾病有关病比如癌症心血管的混乱和阿尔茨海默氏症及相关的神经退行性疾病。另一方面,有新的证据显示过氧化氢可能在细胞信号转换过程中作为第二信使。Nobuaki Soh等设计了香豆素类的H2O2探针,该探针受其他活性氧因子干扰少,专一性强,准确度高。
Du Lu-pei等利用Click修饰设计了香豆素类H2O2探针Scheme7该探针巧妙的利用了Click反应修饰了香豆素基团,使其荧光强度更强,并且使其激发波长增加了70 nm,大大增加了Stoke位移。更加有利于观察和检测,准确度更高。该探针同样具有很好的选择性,且合成材料相对便宜,方法相对简单,有很好的应用价值。
(2) 光谱分析
香豆素类H2O2探针Scheme7的λex = 400 nm,λem = 475 nm
香豆素类单胺氧化酶(MAO)的荧光探针
简介:
单胺氧化酶Monoamine oxidase, MAO是机体内参与胺类物质代谢的主要酶类,位于线粒体外膜质,分为MAO-A和MAO-B两种类型。单胺类物质在机体内具有重要的生理功能,单胺氧化酶的活性异常可引起机体多种功能障碍,形成疾病状态。如帕金森氏病、老年痴呆症及近年来都市中较为流行的抑郁症等均与MAO活性异常有关。Chen等对香豆素类衍生物进行了改进,合成了具有检测MAO生物活性的荧光探针,机理见Scheme1。他们合成了1、3、5探针,发现在MAO的作用下都生成了具有荧光性质的化合物2、4、6,见Scheme 2。
(2) 光谱分析
如下图所示
三个香豆素的检测限分别为λex=401nm,λem=480nm;λex=355nm,λem=490nm;λex=335nm,λem=520nm;
【芘类】
芘,有机化合物,淡黄色单斜晶体(纯品为无色),具有芳香,可燃,不溶于水,易溶于乙醇、乙醚。可进行亲电取代,如卤化、硝化、磺化等反应。芘主要存在于煤焦油沥青的蒸馏物中。芘为有机合成原料,经氧化可制取1,4,5,8-萘四甲酸,用于染料、合成树脂、分散性染料和工程塑料;酰化后可制还原染料艳橙GR及其他多种染料。还可制杀虫剂、增塑剂等。
含芘荧光探针分子芘丁酰谷氨酸(PLE)和芘甲酰谷氨酸(PYE)
简介:
不同间隔链长度的PLE和PYE探针分子在与Lym作用时,表现的光谱性质差别不大,这主要是由于探针分子结合到了Lym的表面;而不同间隔链长度的探针分子在与BSA作用过程中,却表现不同的光物理性质,这可能是探针分子作用于BSA空腔时其结合位点或者结合方式的不同引起的。目前的研究对揭示蛋白质分子的识别位点和定位切割具有重要的意义。
(2) 光谱分析
PLE:
PYE:
L-[4-(1-芘基)]丁酰基苯丙氨酸(PLP)
简介:
,使结合后的PLP分子中的芘基由水相包围转移到血清白蛋白的疏水空腔中;而PLP与溶菌酶的结合方式是其分子中的芘基结合在溶菌酶分子表面的疏水部分,使结合后的PLP仍然被周围的水相所包围。
(2) 光谱分析:
随着Lys浓度的逐渐增大,芘环在327和342 [图2(B)]表明,随着蛋白质浓度的增大,芘基在376和396 [川,且随着蛋白质浓度的增加这种效应越来越明显。