文档介绍：浙江大学
博士学位论文
模拟肽对鸭乙型肝炎病毒抑制作用的研究
姓名:周林福
申请学位级别:博士
专业:内科学(传染病)
指导教师:陈智
20040501
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模拟肽对鸭乙型肝炎病毒抑制作用的研究中文摘要博士生导师研究目的:研究噬菌体表面展示技术筛选的鸭乙型肝炎病毒多聚酶特异结合研究方法:删灞砻嬲故旧秆∮冒蟹肿拥闹票福罕究翁庋∮昧街职蟹肿樱皇腔虮泶锊铮根据测定的序列设计多聚酶铮琍,把段克隆入原核删灞砻嬲故炯际跎秆结合模拟肽:分别以分段表达的秃塑后得到的特异性噬菌体作序列测定,根据测定的序列合成模拟肽。铣赡D怆亩匝家倚透窝撞《疽种谱饔玫难芯浚汉铣傻哪D怆淖饔糜谔逋飧腥的鸭肝原代培养细胞。分时段检测细胞核、细胞浆及培养上清的。婧吮泶锬D怆亩匝家倚透窝撞《疽种谱饔玫难芯俊=D怆男蛄锌寺∪胝婧吮泶载体后一起转入体外感染的鸭肝原代培养细胞并表达。分时段检测细胞核、细胞浆统计分析。有差异,同源性达.%;霭被嵊胁钜欤鞍字释葱源ァ浙江大学医学院内科学静⊙陈智的模拟肽对感染的原代鸭肝细胞中复制的抑制作用。苄寺檠糄蚶┰觯蛄胁舛ā表达载体。测序鉴定正确后,转入表达菌株,以诱导表达并纯化;二是根据绍兴麻鸭蛐蛄蟹治觯铣砂塑绽嗨莆镒鱄坏鉟亩嚯淖魑0蟹肿印类似物作用位点的多肽序列作为靶分子,以删肽库进行筛选,将筛选笛槭莶捎肒—腜产物测序序列。本研究所测绍兴麻鸭序列与公布上海麻鸭序列侄慰寺〔庑蛴朐蛄邢喾月胝罚泶镏乇恋鞍椎姆酘对分博士研究生周林福及培养上清的。结果:肈唇覦:鑫坏浙江大学博士学位论文.,,
子量与预计相符。删逭故炯际跎秆轮后共筛到条的模拟肽序列,根据模拟肽的同源性和理化诤铣傻哪D怆淖饔米橹校粜远哉铡号肽、烹牡纳锨寮鞍械腄康陀谝跣远哉兆阳性对照,烹模%。模拟肽直接作用组对胞浆种坡剩貉粜远哉眨%、烹模侄慰寺〔.—狝訢母粗朴幸种谱饔茫诎诒泶锬D怆淖饔米椋号肽对的复制有抑制作用,但各组对均无抑制作用。关键词:鸭乙肝病毒噬菌体表面展示技术模拟肽原代培养多聚酶性质分析,进一步筛选出跄D怆男蛄薪幸种艱母粗频难芯俊几卧嘌赴诜掷肱嘌旌螅笛樽橛胂喽杂Φ亩哉兆樾翁廾飨圆钜臁含量低远哉兆性对照,烹模号肽阴性对照,。胞内表达模拟肽作用组,阳性对照、烹牡陌珼F溆喔髯槭萦肫涠杂Φ囊跣远哉兆橄啾龋钜烀挥型臣蒲б庖铣傻哪D怆闹苯幼饔米槎韵赴鸇种坡剩貉粜远哉眨%、烹模%、烹模%。胞内表达模拟肽作用组对胞浆种坡剩貉粜远哉眨%、烹模结论:狙芯克蒙苄寺檠糄芯勘尘扒宄梢宰魑1狙芯康牟《灸P汀预计相符,可以作为本研究的靶分子。几卧嘌赴逋馊斯じ腥綝螅嬖诟粗葡窒螅梢宰魑L逋饪笵药物筛选的模型。烹腣阴性对照,浙江大学博士学位论文,..ァァ
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模拟肽对鸭乙型肝炎病毒抑制作用的研究研究背景:慢性乙型病毒性肝炎是一种严重危害人类健康的常见病,慢性乙肝的防治硬化,甚至演变为肝癌。目前有现症慢性乙肝患者多万人,每年有康,而且还为国家带来严重的社会经济负担。慢性肝炎的治疗时间长,医疗费用较高,再加癌的直接医疗耗费约谠H嗣癖摇!啊啊R虼耍7⑶惺涤行У牟《拘愿窝椎闹瘟埔┪铮似的《荆粗凭璕逆转录。其它哺乳动物和禽类嗜肝病毒的发现为人类研究模型。由于鸭子人工感染与人类感染慕峁嗨疲訢腥狙甲邮且桓龊芎的模型,能获得在人类身上不能获得的信息⋯⋯“⋯。位置改变至细胞核中,在里面形成共价闭合环状肿幼魑WB嫉哪0濉T谙那盎蜃镽,可作为狣合成的模板,也是编码核心蛋白和病毒多病毒的复制,选择性地把约前基因组目翘寤约安《径嗑勖附胗珊诵目乖成的核壳体。复制在核壳体中进行,病毒聚合酶把病毒前基因组孀B汲蒁。双链浙江大学医学院内科学静⊙博士研究生博士生导师陈智是一个全球性公共卫生问题,已引起世界各均年发病率为/万。其中尤以乙型肝炎为突出。我国乙型肝炎病毒腥韭矢叽.%,即全国至少有谌烁腥竟鼿。乙肝病毒表面抗原粜月.%,约有亿人,占全球腥菊叩/黄渲性/ǚ⒄刮B愿尾。糠只颊呖煞⒄刮8肝炎相关的疾病,《拘愿窝撞唤鲅现匚:ξ夜嗣竦慕上不恰当的滥用药物,更加重了额外的