文档介绍：中国医科大学
硕士学位论文
Nested PCR法扩增16SrRNA基因检测肺炎支原体
姓名:敬宏
申请学位级别:硕士
专业:儿科学
指导教师:韩晓华
20080401
·英文缩略语·
必颍豪蓟萃盗整盎论文作者签名::申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责中国医科大学研究生学位论文独创·陛声明中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人申臻所里交的学位论文是我本人在导舞指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。任。本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中匿医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并自圜家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C内容除外圆捎糜坝⑺跎蠡蚱渌侄伪4媛畚摹论文作者签名:指导教师签名:日
ɡ┰基因检测肺炎支原体目的方法结果结论·中文论著摘要·肺炎支原体嵌俺扇松缜竦眯院粑栏腥的最常见病原体。但由于缺乏特征性的临床表现及检测方法,这一感染的病原学诊断仍很困难。血清学及培养法耗时、不敏感、并缺乏特异性。为了增强这一感染源的检测,发展了椒ā1疚牟扇硁椒ǎ┰鼍哂兄质特异性的颍酝冀⒁恢置舾行愿撸匾煨郧康姆窝字г宓募觳方法。⑹占例可疑为肺炎支原体引起的肺炎患几的咽拭子。⑻崛。⒁为靶基因,设计滓铮衝┰觥⒌缬竟鄄旖峁⑼臣品治觥ㄓ胛⒘靠帕Dㄏ啾龋诩觳夥窝字г迳暇哂性缙谡锒的特点,且两种检测方法无显著性差异。ǖ牧俅仓副昶兰郏鹤既范缺%;%;。ḿ觳夥窝字г澹诟髂炅渥橹湮薏钜欤岁间出现高峰。ㄊ且恢挚焖俣匾斓募觳饬俅脖瓯局蟹窝字г宓目煽糠耋羹争己
关键词ɡ┰基因可以作为临床肺炎支原体感染的~种早期检测方法,指导临床治疗。;肺炎支原体法。
·英文论著摘要·。髓出甌。&.詅甀瓵.,,·
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ɡ┰基因检测肺炎支原体材料和方法一、材料·论文对象刖肺炎支原体是小儿呼吸道感染的常见病原体之一,国内资料统计其感染率约占社区获得性肺炎的%%,并有逐年上升趋势,国外文献报道甚至超过%翻。。ッ复趺縷钛字г甯腥疚:粑低掣染,.ビ蟹瓮飧腥竞退鸷Γ梢鹌渌嘞低场⒍嗥鞴俚姆瓮獠⒎⒅ⅲ缒阅つ炎、心肌炎、免疫性溶血性贫血及肾炎等‰帕。感染临床表现和呒觳椴痪有特征性,临床上亦缺乏早期有效的诊断方法,且不易与病毒性肺炎、霉菌性肺炎、军团菌病及结核病等相区别,感染常被忽视。目前临床上主要采用的检测方法为微量颗粒凝集法觳庋G蹇固,因其对的检测存在敏感性不高,受时闻限制等的缺点,近年来椒ḿ觳釳蚧竦昧斯惴汗刈ⅲ舾喙胤椒ㄌ峁┙细叩拿舾行裕⒊晒Φ赜τ糜谘芯磕康模鏽关于编码的基因来鉴别瘸原菌的描述日益增多,这一背景下,具有种属特异性的蜃魑0谢虮黄捣钡赜τ檬諴扩增中溆羽。本文收集了例可疑为引起的肺炎患儿,以蛭0谢蚪衝析,并与微量颗粒凝集法及传统ḿ觳饨峁啾冉希峁⑾謓具有更高的敏感性和特异性,更适合箍床的早裳诊断。观察组:年耞年掠谥泄娇拼笱Ц绞羰⒕┮皆憾坪粑瘸房往院的肺炎患夕毛。鼋用庖哂ü夥ḿ觳馀糖搴粑篮鲜┎《尽Ⅳ坎《尽巨细胞病毒、病毒、流感病毒等常规病毒抗体均为阴性,男例,吾ǚ蕖
标本采集二、方法子适度用力擦拭患』屎蟊冢适米硬杉罅⒓粗糜趌越生理盐水中,鼹时抽血主要试剂及药品试验仪器微量颗粒凝集法脱G耍溆喔骺拙酉∈鸵椒年龄岁骄炅.。肺炎诊断标准依据第七版《实用儿科学》。对照组:同期无呼吸系统及其他系统疾病的健康体检儿童例,年龄及性别与观察组无差异。标本的采集均在患儿入院后的小时内完成。患几晨起漱口后,用无菌咽拭臀卤4妫糜谖⒘靠帕Dḿ觳釳固濉试剂盒:由嚣本峁酆厦福塑账岬裙鹤员ι锕こ逃邢薰尽引物:由赛百盛公司和成。肺炎支原体阳性株:由┯岩暌皆憾蒲芯渴姨峁离心机:由中国医科大学盛京医院病毒室提供。牵篗钦爸泄娇拼笱⒕┮皆翰《臼姨峁电泳仪:由中国医科大学盛京医院病毒室提供。采用日本富士肺炎支原体检测试剂盒。①先于臀⒘糠从Π宓准酉∈鸵虎谟靡埔浩饔诘趌孔充分混匀后取云溆啾缚捉卸员断∈停詈㎜丢弃,各孔稀释倍数分别为、:、:、、、;③第孔加来致敏粒子黏溆喔骺灼谥旅袅W鏛;④充分混匀后封板,室温静置焙蠊鄄旖峁?固宓味萳:韵抡卟杉窝G寮觳饪固濉钦攵砸欢位蛏杓屏教滓锝卸嗦掷┰觯仁褂