文档介绍：一、盐析
盐析：溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程
向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，是物理变化，可复原。
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（一）基本原理
蛋白质的溶解特性取决于其组成、构象、周围环境的物理化学性质以及溶剂的可利用度。
这些性质就本质而言是水分子间的氢键和蛋白质表面所暴露出的N、O原子的相互作用，所以易受溶液温度、pH值、介电常数和离子强度等参数的影响。
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蛋白质在自然环境中通常是可溶的，
表面：大部分是亲水基团
内部：大部分是疏水基团
蛋白质呈稳定的分散状态
***物质，一定pH下表面带有一定的
电荷，静电斥力作用使分子间相互排斥
蛋白质周围的水分子有序排列，在表面形成水化膜，这一层能保护蛋白质粒子避免因碰撞而聚沉。
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当向蛋白质溶液中加入中性盐时：
低盐--盐溶(低盐情况下，随着中性盐离子强度的增加，蛋白质溶解度增大)
高盐--盐析(高盐浓度时，蛋白质溶解度随之减小)
盐离子部分中和蛋白质的电性，使分子间排斥作用减弱
中性盐的亲水性比蛋白质大，盐离子在水中发生水化作用从而使蛋白质脱去水化膜，暴露出疏水区域
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H+
OH-
+
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pH<pI,带正电，有水膜，是稳定的亲水胶体
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pH>pI,带负电，有水膜，是稳定的亲水胶体
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pH=pI时, 有水膜，是不稳定的亲水胶体
中性盐
破坏水膜
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+
中性盐
破坏水膜
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中性盐
破坏水膜
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中性盐
中和电荷
SO42-
中性盐
中和电荷
NH4+
或Na+
蛋白质的盐析机制示意图
蛋白质沉淀
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蛋白质在水中的溶解度不仅与中性盐离子的浓度有关，还与离子所带电荷数有关，高价离子影响更显著。
通常用离子强度表示对盐析的影响。
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1 2 3 4 5 6

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碳氧血红蛋白的lgS与(NH4)2SO4离子强度μ的关系
S0
β
μ(离子强度)
lgS
盐析
盐溶
盐析区:
lgS = β - Ks μ
蛋白质溶解度
常数
盐析常数
盐离子强度
蛋白质溶解度
起始蛋白浓度
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（二）无机盐的选择
在蛋白质盐析中，常用的盐析剂有(NH4)2SO4, Na2SO4， MgSO4，NaH2PO4，NaCl， Na3PO4, K3PO4。
(NH4)2SO4原因
廉价
在水中溶解度大，且溶解度随温度变化小，低温下仍具有较大的溶解度
对大多数蛋白质的活力无损害
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0 20 40 60 80 100
中性盐
温度（oC）
(NH4)2SO4
Na2SO4
MgSO4
NaH2PO4
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常用盐析剂在水中的溶解度（g/100ml水）
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盐析效果：阴离子 > 阳离子
尤其以高价阴离子更为明显。
常见阴离子的盐析作用顺序：
PO43- > SO42- > CH3COO > Cl > NO3 > ClO4 > I > SCN
阳离子对盐析效果的影响：
Al3+ > H+ > Ba2+ > Sr2+ > Ca2+ > Cs+ > Rb+ > NH4+ > K+ > Na+ > Li+
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