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我国葡萄根癌农杆菌质粒的特征
马德钕
中目营科学院微生物研究所北京/./口/坷//.
摘要以窄宿主葡萄农杆菌. 『
质粒的—区、和基因座位三及
‘和—片段为探针,对株我国分离的不同生物型质粒类型和寄主范围
韵葡萄根癌农杆菌的质粒转移—进行杂交分析。在株生物
型质粒菌株中,与上述探针均同源。其中窄宿主葡萄根癌农杆菌菌株杂交片
段彼此较一致。广宿主葡萄根癌农杆菌菌株的杂交片段彼此差异较大。株无致癌能力的生
物型菌株与个探针均不杂交。株生物型质粒菌株及株诱导冠瘿瘤中
只合成精氨酸的菌株,杂交带的变化也大。由此可见葡萄农杆菌在生物进化过程中其转移
呈多态性,成为农杆菌中特殊类群。本分析对葡萄掇癌农杆菌致病菌株的鉴定亦有帮
助。
关键词堕葡
葡萄根癌农杆菌是农杆菌中较为特殊的与众不同的种类,尽管人为接种时它亦能对
一些双子叶植物致瘤,但有严格的寄主特异性。在自然界中这种生物型农杆菌总是与
葡萄寄主相关,引起根癌病,给葡萄种植业带来重大经济损失。
农杆菌对植物的致瘤能力及寄主范围主要由其质粒所决定。对广宿主生物型
质粒根癌农杆菌和窄宿主葡萄根癌农杆菌等质粒的—
区和区基因的比较研究, 已能从分子生物学方面揭示和
它们间差异的原因“一。对生物型葡萄根癌农杆菌各菌株质粒的特征,虽有一些研
究报道,但还没有深入到比较其转移同源性的研究。本文报告从我
国北方分离的某些生物型和生物型葡萄根癌农杆菌所含质粒图谱,并对其中一些菌
株质粒的—区进行同源性分析比较,阐明这类细菌质粒的多种多样性以
及其与植物致瘤能力的关系。
材料和方法
. 菌株
所用的根癌农杆菌均是从我国葡萄冠瘿瘤分离出,大部属于生物型
质粒,只有少数属质粒及生物型质粒菌株。这些菌株人工
接种感染植物,其宿主范围有较大差别,据此又分为宽宿主与窄宿主
范围两种,我们以人工接种能使向日葵、蕃茄、烟草及更多植物幼苗致癌的称宽宿主,只对
葡萄苗致瘤者称窄宿主,但两者均对葡萄的致瘤能力强袁
‘国家自然科学基盘资助项且。
丰文亍年月日收到。
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期马德钦: 我国葡萄根癌农杆菌质粒的特征
. 质粒的检测
使用改良碱裂解法进行。
. 分离和杂交
作为分析葡萄农杆菌—区同源性所用的探针,来自窄宿主质粒
的区一些基因座位。个探针分别为: 基因含的
.片段; ;基因含一
.—片段, 片段含片段以及带有整
个片段的粘粒克隆子。上述探针均为美国华盛顿大学博
士赠送,探针位置及大小见文献。除外,所有探针片段均克隆在
中。·
寰实验用■麓报癌农扦曹的..钲

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杂交探针质粒按文献【】分离。农杆菌总按先前使用方法提取,经
酶消解完全后,琼脂糖凝胶电泳区分开,吸印转移至硝酸纤维素滤膜与探针进行
滤膜杂交,本试验的杂交和水洗在相对低的双键解链温度× 一.%
, ℃下进行
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微生物学报卷
结果
己质粒的比较
实验