文档介绍：论文题目:乌珠穆沁羊肉结缔组织中蛋白多糖的提取和研究
导师: 格日勒图
答辩人: 王富贵
专业: 食品科学与工程
目录
引言
材料与方法
结果与分析
结论
1引言
乌珠穆沁羊是在内蒙古乌珠穆沁草原生态环境下生长的地方优良品种。以往对乌珠穆沁羊的研究主要集中在遗传育种,饲养方面居多。羊肉的相关研究也主要集中在宰后肉的成熟、饲草料和肉风味物质之间的研究较多而肉中结缔组织中蛋白多糖的研究很少,国内对结缔组织中蛋白多糖含量对家畜肉品质的影响程度的报道几乎没有。本试验以乌珠穆沁羊为研究对象,利用梯度胶的原理制胶进行电泳对其肌肉内结缔组织中蛋白多糖的提取和研究,解释了蛋白多糖在肌肉结缔组织中的重要地位以及对肉品质的影响,这对于我国畜产品加工具有重要意义。
2材料与方法
试验材料
新鲜羊肉:选择内蒙古锡林郭勒盟白音锡勒牧场自然放牧条件下的乌珠穆沁羊。采用的肉羊是同一个羊群中选择的年龄相同的去势公羊。屠宰后采集背最长肌肉,将样品放置在-20℃条件下保存,备用。
试验方法
蛋白多糖的调制
蛋白多糖的浓度测定
蛋白多糖的浓度测定采用了双缩脲法(Buriet[12]法),用牛血清蛋白(BSA)作为标准蛋白。
表1 牛血清蛋白浓度配制
图1 蛋白质标准曲线
编号
1
2
3
4
5
6
10 mg/ml BSA (mL)
0

H2O(mL)

0
双缩脲试剂(mL)
4
4
4
4
4
4
样品测定
不同样品分别按下列混合,放置30min
(4种样品分别做三个平行样)
样品 ml
KOH ml
Biuret 4 ml
测出吸光度,由标准曲线得到的公式计算得出各样品的浓度。
表3 样品OD值
糖蛋白吸光度
OD平均值
糖蛋白浓度mg/ml
1
2
3
OD(D1)/A

OD(D2)/A

OD(D3)/A

OD(D4)/A

-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)
采用Y. Ueno[13] 的方法,~10%的分离胶和4%的浓缩胶。恒电流20mA,用阿辛蓝和考马斯亮蓝R-250进行染色,染色后不用脱色,利用凝胶电泳系统成像。
表2 梯度胶的的制作
编号
1
2
3
4
5
10﹪分离胶
2ml

1ml

0ml
﹪分离胶
0ml

1ml

2ml
浓度
10﹪
﹪
﹪
﹪
﹪
3结果与分析
图3 四种不同浓度蛋白多糖的SDS-PAGE图谱
注:A: marker, D1、D2、D3、D4 为不同浓度的蛋白多糖
图4