文档介绍：学位论文使用授权书声明独创性声明工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的的法律责任。本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,有被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明学位论文作者签名:秦照玲签字日期:年日权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ榱睿导师签名:戚中田
英文缩略词表炕掖。溴↖哚基磺酸英文缩写盯甲英文全称中文名称氨基酸抗体血管紧张素转化酶抗原氨苄青霉素碱性磷酸酶过硫酸胺碱基对牛血清白蛋白疾病预防控制中心互补脱氧核糖核酸细胞毒馨拖赴焦碳酸二乙酯培养基二甲亚枫脱氧核糖核苷酸脱氧核糖核酸酶脱氧三磷酸核苷双链溴化乙锭’乙二胺四乙酸增强型绿色荧光蛋白胎牛血清磷酸甘油醛脱氢酶小时乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒第二车:恕畗輑宦畚缩略词瓸.!.
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有巨大应用潜力而倍受关注的扇技术,可能为摘要个时姨两条单链末端为涣姿岷’一羟基,且硕加鐾怀龅姆哺乳动物细胞后,既能引起加,又可避免干扰素效应。因此,通过引入靶年底,在我国广东省最先出现,随后在全球多个国家和地区爆发流行的严重急性呼吸综合征,脖怀莆4性非典型性肺炎,具有高度传染性和强烈致病性,临床症状以高热、干咳及呼吸困难为主,急性呼吸衰竭是导致患者死亡的主要原因,由于是新出现的传染病,缺乏有效的防治手段,加上人群对这种病毒暂无免疫力,病死率较高,给人类健康、社会经济发展及国家安全造成了严重的危害。对其核苷酸和氨基酸序列进行分析,特别是对蜃畋J厍蔚耐葱员冉媳砻鳎貌《静皇粲类已知冠状病毒中的任何啵且恢中滦凸谧床《荆猄谧床《.琒瓹粲诔沧床《灸、冠状病毒科、冠状病毒属且恢智蛐巍⒂邪さ牡フ碦病毒。其基因组长约,基本结构为:幻弊唇峁挂桓粗泼一刺突糖蛋白恍“’,;岬牟《颈砻嫱黄鹛堑鞍浊疤澹鬒型跨膜糖蛋白,有个潜在的糖基化位点,其撕蚦端相对保守。现认为,冠状病毒鞍椎陌被丝捎胨拗飨赴砻媸芴褰岷希餾蛋白构象发生改变,,鞍咨虾兄匾12《究乖定簇,可刺激机体产生中和抗体,为冠状病毒疫苗的重要候选抗原之一,其基因突变会直接影响病毒的致病性。目前,对于干扰素和蛋白酶抑制剂等抗病毒药物或疫苗的研制虽然已取得较大进展,但仍无特效药或疫茁闯世。近年来在疾病治疗中具研制抗药物提供了一种新策略。扇攀侵竿庠此碦籖易逯械腄酶切割为龊塑账,男「扇臨,配对碱基,与胞内一核酶复合物结合形成盏汲聊春衔琑,激活后通过碱基配对定位到同源转录本上,进行切割,导致相应的基因沉默,属于转录后基因沉默机制琍,它是年在研究反义核苷酸时发现的。扇畔窒蠊惴捍嬖谟谥参铩⑾叱妗⒐壬镏校诓溉槎锵赴中,长双链会引起干扰素效应,促使细胞凋亡;。
化,而根据本实验的结果,我们可推测用哺乳动物偏爱密码子替换野生型如因可能是真核细胞对所表达蛋白进行了糖基化等翻译后修饰。序列特异的聊虻谋泶铮唤隹梢匝芯扛没虻墓δ芎透丛拥男藕糯ǖ途径,还可以对癌症,神经系统性疾病,感染性疾病等人类疾病进行基因治疗性研究。作为一种抑制基因表达的新技术,舢已成功用于抑制/炔毒在体外培养细胞中的复制,因此,基因组为单正链膕瓹可以作为作用的靶标,通过降解病毒源锏娇共《镜哪康摹1狙芯恐校颐钦攵鞍装被松杓撇⒂肨泶锵低程逋庾B己铣闪肆蕉蜸基因特异的2⒀∮肊畇和无关分别作为阳性和阴性对照,结果证明了这两段苡行姨匾斓匾种芐蛋自豹表达。一、—掏获虻鞍在赴械谋泶选人胚肾赴K拗飨赴珽诤系鞍孜1ǜ婊颍冉野生型和部分密码子优化的在细胞内的表达效率。分别将真核表达质粒甋吧和苈胱佑呕转染细胞,小时后,用荧光显微镜观察转染细胞中的绿色荧光数量和荧光强度,检测融合蛋白的表达,结果显示,H镜南赴兄患少量绿色荧光,而转染的细胞中可见大量绿色荧光,且二者转染细胞