文档介绍:重庆医科大学
硕士学位论文
pET32a-XBP1u蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备
姓名:李婧
申请学位级别:硕士
专业:遗传学
指导教师:郭风劲
20090501
—鞍椎脑吮泶铩⒋炕多克隆抗体的制备摘要研究目的真核细胞中薪岷系鞍譴。琗作为一种转录活化因子发挥着多种不同的功能,具有广泛的生物学效应,参与机体的多种生理及病理过程,其对疾病发生及发展的影响是近年来研究的热点。本研究首先运用多聚酶链式反应⒒蚩寺〉确肿生物学技术构建了重组质粒,通过将其转化入大肠杆菌,得到大量包涵体表达的目的蛋白肗树脂对目的蛋白进行纯化,之后进一步应用对纯化的目的蛋白进行分析,以鉴定得到的纯化鞍祝酶么炕鞍酌庖呒兔制备抗嗫寺】固澹佣=徊窖芯縓纳镅Ч能及其他相关后续研究奠定基础。研究方法褂米躌提取试剂盒约梁从肝癌细胞刑崛∽躌,并利用两步法扩增出目的片段梅肿涌寺〖际踅康幕蚩寺〉絧甌载体上,构建成重组载体。梅肿涌寺〖际豕菇ㄔ吮泶镌靥錺甤重庆医科大学硕士研究生学位论文
刈樵靥錺;,,并利用树脂对目的蛋白进行纯化,之后用法测定所表达的目的蛋白浓度。肳鉴定目的蛋白的正确性。么炕蟮哪康牡鞍鬃魑?乖庖呒彝弥票付嗫寺】固濉检测兔抗G宓男Ъ邸检测兔抗G宓奶匾煨浴研究结果┰龀隽四康幕蚱蝀,经测序组成,为编码霭被岵谢亩嚯摹晒菇嗽吮泶镌靥錺⒆;,主要以包涵体形式表达,经柱纯化后,纯度达%以上,ú獾玫鞍字屎课./。对目的蛋白进行分析,。检测兔抗G逍Ъ畚猯:庖哂〖<觳馔每筙血清的特异性。,用菌甤。重庆医科大学硕士研究生学位论文
结论成功构建原核表达质粒,转化到大肠杆菌甤表达菌获得了目的蛋白泶锪拷细撸慷冉细撸徊⒔步制备了纯度较高的抗嗫寺】固澹Q芯縓的生物学功能及其他相关后续研究奠定基础。关键词:産结合蛋白康牡鞍祝琖分析重庆医科大学硕士研究生学位论文
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英汉缩略语名词对照中文全称氨苄青霉素碱基对英文缩写英文全称薪岷系鞍滓内质网未折叠蛋白反应需肌醇蛋白牛血清白蛋白增强化学发光脱氧核糖核酸脱氧核苷三磷酸二硫苏糖醇大肠杆菌乙二胺四乙酸酶联免疫吸附测定异丙基硫代肴樘擒含氨苄青霉素培养基培养基分子量聚乙二醇镍一次氮基三乙酸光密度聚丙烯酰胺凝胶电泳磷酸盐缓冲液聚合酶链反应十二烷基硫酸钠重庆医科大学硕士研究生学位论文艨甤—.
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重庆医科大学研究生学位论文独创性声明学位论文版权使用授权书论文作者签名:指导教师签名:期:本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。学位论文作者签名:日期:本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C苣谌莩,可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。日