文档介绍：《蛋白质盐析实验条件的探究》
蛋白质盐析实验条件的探究
黄秋静
广西师范大学化学与药学学院桂林
摘要对影响蛋白质盐析的实验条件进行了探究。认为其中三个主要影响因素为:鸡蛋清溶液的浓度、盐溶液种类、酸的加入顺序,最终总结得出蛋白质盐析实验的适宜条件。
关键字蛋白质盐析实验条件
Inquiry experiment conditions of protein salting out
Huang-Qiujing
School of chemistry and pharmacy, Guangxi Normal ,China Abstract: The experimental conditions affecting protein salting out of the research. The three main factors: the egg white solution concentration, salt solution type, acid addition order, finally summarizes suitable conditions of protein salting out experiment.
Key word:protein salting out experiment condition
1 引言
在蛋白质溶液中加入一定浓度的强电解质盐,如(NH4)2 SO4 等,蛋白质从溶
液中析出,这种作用称为盐析【1】。蛋白质盐析是高中阶段的重要演示实验,但实际操作中常常不能出现沉淀。盐析作用的实质是高浓度的强
电解质破坏蛋白质分子表面的水化膜,同时电解质离子中和了蛋白质所带的电荷,蛋白质的稳定因素被消除,使蛋白质分子相互碰撞而凝聚沉淀【2】。蛋白质的溶解性受所带电荷和溶液离子强度的影响,而蛋白质所带电荷与溶液的pH有关,溶液离子强度与强电解质的无机盐自身性质有关。因此本文通过改变影响蛋白质溶解性的三个主要因素:鸡蛋清溶液的浓度、盐溶液种类、酸的加入顺序等进行蛋白质盐析实验的探究,以期寻找盐析实验的最佳反应条件。
2 实验内容及结果讨论
鸡蛋清溶液浓度对盐析的影响
表1 相同盐溶液在不同浓度的鸡蛋清溶液中的盐析
注:鸡蛋清液过滤时选用浸湿再拧干的纱布叠成4
层放入漏斗中过滤。过滤后黏在纱布上的物质弃之不用。
实验表明,纯鸡蛋清液和过滤后的鸡蛋清液盐析实验效果最好,但纯鸡蛋清液加水复原时出现分层,过滤后的鸡蛋清液盐析效果更好。鸡蛋清中的蛋白质主要有卵清蛋白,卵黏蛋白,伴清蛋白等,其中卵清蛋白,伴清蛋白溶于水、稀酸和稀碱,而卵黏蛋白不易溶于水。因此,需要把不易溶于水的卵黏蛋白过滤掉,加水后才不会出现分层。
盐的种类对盐析的影响
表2 不同饱和盐溶液在过滤后的鸡蛋清液中的盐析
注:每组实验所用鸡蛋清液都经过滤但没加蒸馏水;表2买验在室温19°C下进行。离子强度与离子浓度、离子所带电荷有关。从盐的溶解度表中可以看出,20℃时,(NH4)2 SO4 的溶解度最大,NH4Cl,NaCl,
MgSO4·7H20的溶解度近似相等,且他们的溶解度都随温度变化不大;Na2SO4的溶解度随温度变化最大。此外