文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
中国人2型糖尿病家系中GCK基因突变的初步筛查
姓名:杨震
申请学位级别:硕士
专业:内科学(内分泌专业)
指导教师:吴松华
20040501
中国人吞悄虿〖蚁抵蠫基因突变的初步筛查中文摘要葡萄糖激酶,是哺乳动物橇姿嶙R泼讣易逯幸桓鼍哂刑异生化功能的橇姿嶙R泼福的起始转化是葡萄糖代谢通路上第一个限速步骤,并在维持血糖稳态过程中起着关键作用。在肝脏,该酶是葡萄糖贮存和处理的重要调节因子。在胰腺盘细胞,魑葡萄糖感应器调节糖酵解速率,结果,在控制葡萄糖刺激的胰岛素分泌讨起关键作用。蛱蕹男∈蟊硐治G岫雀哐L呛推咸烟谴碳さ囊鹊核厥头攀损。在人类中,雍匣蛲槐淇傻贾赂妹覆糠中匀毕莺蚆嗌倌昶鸩〉成人型糖尿病喙兀桓没虼亢贤槐淇傻贾赂妹富钚酝耆Щ畈⒁鸪志眯孕律糖尿病。目前在中国糖尿病人群中,尚未见对蛲槐浣写蠊婺I覆榈谋ǖ馈本研究的目的是对中国糖尿病人群进行蛉ǔ包括编码区及侧翼区进行筛查,并对突变先症者及其家系成员进行基因型和临床表型分析,了解中国人蛲槐涞牧俅蔡氐恪4佣2魈悄虿》⒉〉囊糯ɑ铺峁┙徊降囊谰荨背景饕T谝认伲卧嗪筒糠稚窬!⒊ο赴斜达,早已证实翘谴煌返闹匾W槌刹糠郑浯呋钠咸烟堑磷酸葡萄糖目的上海第二医科大学硕宦畚
杂合子材料和方法本研究从有三代或三代以上糖尿病家族史,家系中有一个或以上糖尿病起病者年龄辏换蛲槐仓杏个以上糖尿病患者,至少一个或以上糖尿病者起病者年龄岁的吞悄虿〖蚁抵醒∪√悄虿』颊每个家系选悄虿』颊例,运用聚合酶链反应┰鯣基因个外显子及其侧翼内含子和外显子的交界区,然后用直接测序法得到所扩增片段的序列。经软件和正常序列比对后,筛查出突变。发现突变糖尿病治疗方案、并发症等鸵鹊簗赴δ芗觳包括摹⒁/,血脂水平正常。对先证者家系进行因序列分析发现先证者的父亲为突变杂合子,表明该变异来至于先证者的父亲。其父的空腹血糖/崭挂鹊核/,母亲患有糖尿病。在的欠肭,位于翻译起始点上游处狢:;;褂幸桓鲂碌亩嗵琁另外和基因文库比较发现在所有中国人群ㄌ悄虿『驼H蚨即嬖谌缦卤湟霦’—,,Ⅳ后同样使用直接测序法在例对照中进行该突变位点频率的筛查。同时对突变先证者及其家系成员进行基因检测、⒀V住⑹占俅沧柿起病年龄、生化、血压、试验等⒎治鐾槐浼蚁党稍钡囊糯ǚ绞健8帽湟旆⑸谥饕T诟卧啾泶锏腉基因外显子的剪切位点的给位附近。先证者是一突变杂合子,男性,现年岁,在半年前发现糖尿病,身高逯珺,/,空腹胰痬崭笴肽/,,,没有发现该变异。在本研究中发现龆嗵坏悖渲个是已被报道过的多态位点,分别是外显子结果上海第二医科大学硕士学位论文琁,
谥泄薓蚁抵蟹⑾忠桓鲂碌腉基因变异位点,即O戎者家系中突变者皆有糖尿病,且皆为杂合突变。⑾个多态位点,其中鍪且驯槐ǖ拦亩嗵坏悖直鹗峭庀宰’非单基因突变翻译区挥诜肫鹗嫉闵嫌籌;褂幸桓鲂碌亩嗵琁突蛭目Ⅱ≠比较发现在所有中国人群ㄌ悄虿『驼H基因都存在如下变异的疷关键词蛲槐结论狦琁,籌琁汉5诙娇拼笱妒垦宦畚
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引言成年发病型青幼年糖尿病是一种呈临床异质性的疾病,其以非酮症倾种突变基因基本上呈两类:即一类为葡萄糖激酶蛲槐.,和另一类转录因子基因突变,包括肝细胞核转录因子神经分化因子蛲槐渌碌腗是的最常见原因,蛲槐涓鎏逯槐编码分子量为个氨基酸残基的蛋白。谝认伲魏湍灾斜泶铮其在这些区域葡萄糖稳态的调节中起着重要的作用。组织特异性的启动子的呈现允许分化调节和转录不同的转录产物而产生植煌ざ劝姹镜耐庀宰觢,蚦簧游启动子在胰腺和脑中具有功能,而下游启动子只在肝脏中起作用。和在肝脏中表达,在胰腺中表达。在体内,缘ヌ宕呋姿岽覣转移到翘墙徒馔返闹匾W槌刹糠帧F浯呋姆从κ瞧咸烟谴坏牡谝桓鱿匏俨骤。研究证实谘L俏忍衅鹱胖匾5淖饔谩T谝认伲咸烟羌っ傅墓δ苁亲为赴谄咸烟谴ǜ衅骼吹鹘谄咸烟谴碳さ囊鹊核胤置,通过控制葡萄糖进入糖分解通路的速率来控制随后的代谢率。在肝中表达的谔窃芍衅鹬向的糖尿病,常染色体显性遗传,通常在岁以前发病及频繁发生于儿童和青少年和以赴δ苋毕菸L卣鳌D壳爸辽儆种不同基因突变可致发生。这蠮、、胰岛素启动因子口亢,同样被称为赴鸈盒转录激活因子。所有这些基因都在赴斜泶铮渲腥魏我恢只蛲槐涠伎傻贾翨细胞功能不良和糖尿病。编码葡萄糖激酶和转录因子,疊基因突变的发现提示是